Ремонта во время: Тихие вместе: в РФ хотят ограничить время ремонта до трех дней в неделю | Статьи

2 Июл

Содержание

Тихие вместе: в РФ хотят ограничить время ремонта до трех дней в неделю | Статьи

В России предложили ограничить шумные ремонтные работы в жилых домах до трех дней в неделю, но не распространять норму на новостройки. С инициативой внести такие изменения в законодательство выступили в Общественной палате РФ, соответствующее письмо направлено главе Минстроя Иреку Файзуллину (есть у «Известий»). Идею поддержали в «Деловой России», эксперты общественного совета при Минстрое и в Госдуме. Сегодня шумные ремонтные работы разрешены восемь часов в сутки, кроме воскресенья и праздников. Но длительный сильный шум мешает работать на удаленке и негативно сказывается на здоровье, считают авторы инициативы.

Новая реальность

В 2020 году в России был принят закон об удаленной работе, который в том числе предусматривает, что работодатель может переводить сотрудников на дистанционку в случае чрезвычайных ситуаций, напоминается в письме в адрес главы Минстроя Ирека Файзуллина. Документ подписал первый зампредседателя комиссии по экспертизе общественно значимых законопроектов и иных правовых инициатив Общественной палаты Артем Кирьянов.

Пандемия коронавирусной инфекции продолжается. Но, вероятно, что даже с ее окончанием из дома будет работать гораздо больше людей, чем раньше, сказал «Известиям» Артем Кирьянов. При этом зачастую на эффективность удаленной работы влияют бытовые факторы, в том числе ремонт у соседей. Продолжительный шум негативно сказывается и на здоровье, указал он.

Фото: ИЗВЕСТИЯ/Алексей Агарышев

Сегодня на проведение шумных ремонтных работ в России отводится не больше восьми часов в сутки, в воскресные и праздничные дни они запрещены. Также предусмотрен двухчасовой перерыв днем, рассказал Артем Кирьянов. Правила регламентируют региональные подзаконные акты. Например, в Москве шумные работы разрешено проводить с 9:00 до 13:00 и с 15:00 до 19:00.

В условиях новой реальности предлагается изменить правила — ограничить разрешенное время на проведение шумных ремонтных работ до трех дней в неделю (например, понедельник, среда и пятница) с сохранением «тихого часа», следует из письма общественников. Исключение предлагается распространить на новые дома (до 18 месяцев со дня ввода в эксплуатацию).

— Мы поддерживаем инициативу. В первую очередь поскольку не все работы являются шумными, а только не более 10–15%, — сказал «Известиям» член комитета по строительству «Деловой России», генеральный директор ГК Smart Engineers Хусейн Плиев.

В числе шумных, например, работы с перфоратором, болгаркой, резка плитки, указал эксперт в сфере строительно-технической экспертизы Судебно-экспертной палаты России Антон Хайбрашев. Если грамотно спланировать ремонт, такие работы можно распределить на разрешенные дни, а в остальные выполнять другие задачи, подчеркнул он.

— Объем шумных работ при ремонте, не затрагивающем конструктив стен или переустройство сетей, выполним в течение двух-трех дней. Покраска стен, облицовка плиткой или поклейка обоев не вызывают шум. Поэтому в давно заселенных домах шумные работы нужно ограничивать, — сказал эксперт общественного совета при Минстрое Илья Пономарев.

Инициатива заслуживает внимания, ограничение времени шумных ремонтных работ нужно обсуждать, полагает член комитета ГД по жилищной политике и ЖКХ Илья Осипов.

— Нужно выработать оптимальный режим. Если для строителей шум — это производственная необходимость, то для людей, которые находятся дома, это действительно невыносимо, сущий ад, — подчеркнул он.

Фото: ИЗВЕСТИЯ/Алексей Агарышев

Чтобы ввести ограничения, нужно провести детальный анализ ситуации, общественные слушания, полагает зампредседателя комитета ГД по контролю и регламенту Наталья Костенко. Многие граждане после завершения пандемии продолжат работать вне дома, а у них для ремонта есть только выходные, отметила она.

Не всё просто

Если ввести дополнительные ограничения, могут возникнуть проблемы с исполнением правил. Оценить уровень шума от ремонта, доказать, что он превышает нормы, и, главное, привлечь к ответственности и наказать за неисполнение далеко не просто, указал Антон Хайбрашев.

В соответствии с действующим законодательством в зависимости от региона уровень шума не должен превышать 30 децибелов, отметил он. Ограничения распространяются на ремонтные и строительные работы в квартире или другом здании, а также на бытовые звуки, указал главный инженер градостроительного института пространственного моделирования и развития «Гипрогорпроект» Сергей Сафронов.

Чтобы доказать превышение уровня шума и привлечь к ответственности, нужно зафиксировать это, получить подтверждающее заключение эксперта и только на основании этих документов жаловаться в соответствующие инстанции, указал Антон Хайбрашев. На всё это уходит не один день, поэтому, пока человек добивается справедливости, как правило, ремонтные работы уже завершаются, сказал он.

Фото: ИЗВЕСТИЯ/Алексей Майшев

— Получается, что и действующие правила на деле не защищают граждан от дискомфорта. Поэтому и ограничения, которые предлагаются, принципиально ничего не изменят, — считает Антон Хайбрашев.

Действительно, из-за отсутствия единых правил в России нередко граждане сталкиваются с подобными сложностями, сказал Илья Осипов. В 2020 году в Госдуму внесли законопроект «О тишине», на федеральном уровне обязывающий соседей соблюдать тишину по ночам, напомнил он.

Стоит работать над уменьшением звукопроницаемости стен в новостройках, уверена Наталья Костенко. Сегодня в новых домах зачастую слышны не только ремонтные работы, но даже и просто громкие разговоры, подчеркнула она.

В жилом доме на Скоморошинской во время ремонта кровли затопило несколько квартир — Общество

Линолеумные подстилки, одеяла, тряпки и ведра уже не справляются с потоком воды, она течет с 9 по 1 этаж. Уборщица еле справляется с коммунальной бедой, но лужи, как грибы после дождя, появляются снова.  

Потоп в многоэтажке начался после того, как подрядная организация приступила к капитальному ремонту кровли, как раз в то время, когда на улице морозы и снегопады сменились оттепелями.

Жить в доме стало невыносимо, признаются рязанцы.

 

Когда начался дождик, начало по водосточной трубе течь, да так текло, что мы столько тазов вылили воды. Чего мы тут только не делали!

Нина Мирошина, жительница дома №15 к.2 по улице Скоморошинской.

 

Мы думали, что они хоть толью покроют, хоть что-то сделают. Но никто и ничего. Причем все инстанции обошли, все всё знали. И наше домуправление – все только: «Да, да, да». Дело дошло до того, что опять тазы и тряпки. Все одно и то же.

Галина Борисова, жительница дома №15 к.2 по улице Скоморошинской.

Проблема с прохудившейся крышей в доме по улице Скоморошинской с давней историей. Кровлю латают регулярно то управляющая компания, то сами жильцы.

Сильно текло, да. Потом сделали, и у нас больше не было, сами делали, муж делал крышу, договаривались с 9 этажом. Сейчас, вроде, капремонт, должны сделать, но не вовремя, видимо, начали.

Наталья Варлашина, жительница дома №15 к.2 по улице Скоморошинской.

После визита съемочной группы «Вестей» в промокший до нитки дом на осмотр приехала   комиссия из Фонда капремонта. Жильцам они пояснили, что замена кровли по программе была запланирована лишь на 2022 год, но критичное состояние крыши не позволило ждать ремонтные работы столько времени.

К нам обращалась управляющая организация, побыстрее сделать крышу, потому что крыша проблемная, она текла и течет, в соседних подъездах это все видно. Чтобы люди зимой были без протечек, встретили Новый год, мы попросили подрядную организацию, так мы планировали в 2022 году крышу делать, чтобы они вышли сейчас ее делать.

Александр Штатнов, директор по организации и проведению капитального ремонта фонда капитального ремонта Рязанской области.

Порядная организация в первую очередь занялась ремонтом ливневой трубы, именно поэтому в доме начался такой сильный потоп в период обильного таяния снега. Но рабочие, как пообещали сотрудники Фонда, все протечки устранят в течение двух недель.

Здесь крыша будет закрыта рулонным материалом и законсервирована. И работы продолжатся в следующем году.

Александр Штатнов, директор по организации и проведению капитального ремонта фонда капитального ремонта Рязанской области.

Сейчас, когда на улице подморозило, работы пойдут быстрее, уверяют в Фонде капремонта, потоков не будет, главное — чтобы из-за открытой кровли рязанцы не замерзли.

когда можно делать ремонт в квартире

Обустройство новой квартиры или косметическая отделка старой — процедура шумная и трудоемкая, которая занимает не один день и даже неделю. При этом строительные фирмы-подрядчики и собственники жилплощади, выполняющие работы самостоятельно, не всегда соблюдают время ремонта по закону, создавая тем самым дискомфорт соседям. Некоторые и вовсе не задумываются над этим вопросом и продолжают штробить стены, громко стучать отбойником и сверлить перегородки электродрелью даже после полуночи.

Какие законы устанавливают, в какое время делать ремонт

Правовые аспекты внутренних отделочных работ, сопряженных с шумом, волнуют многих жильцов. Однако единого документа, который регламентировал бы время ремонта в многоквартирном доме и частном жилище, к сожалению, не существует. В каждом отдельном регионе Российской Федерации разрабатываются собственные постановления и правила, устанавливающие допустимые временные рамки для деятельности, связанной с переустройством помещений. Также в различных городах существуют специальные нормы эксплуатации жилищного фонда, которые предусматривают ответственность за нарушение времени ремонта по закону (чаще всего в виде штрафов).

Чтобы не мешать соседям, ремонт нужно делать только в разрешенное законом время

Все действующие на территории страны правила предназначены для защиты интересов физических и юридических лиц, являющихся собственниками жилой площади в многоквартирных зданиях. Разработка и утверждение правовых норм происходит на базе Постановлений Госстроя Российской Федерации, а также в соответствии с Административным, Жилищным и Гражданским кодексами РФ.

Со скольки и до скольки можно делать ремонт в квартире

Рассматривая вопрос о том, в какое время можно делать ремонт, в целом, следует выделить основные моменты, которые одинаковы для большинства городов России. Так, практически во всех регионах страны действуют следующие ограничения:

  • в будние дни (с понедельника по пятницу) разрешается приступать к шумным работам не ранее девяти утра, и заканчивать их нужно не позднее семи вечера;
  • запрещено проводить ремонт в выходные дни, даты государственных праздников;
  • не разрешается, чтобы любые строительные работы начинались до 8:00 и заканчивались после 20:00;
  • предыдущий пункт касается также ввоза строительных материалов и вывоза/выноса мусора с места производства работ;
  • не допускается проводить ремонт в выходные и праздничные дни, если он связан с ведением пожароопасных работ;
  • продолжительность непрерывной строительной деятельности не может превышать шести часов; в противном случае необходимо сделать паузу на шестьдесят минут (или больше), после чего можно будет снова приступить ее к выполнению.

Стоит отметить, что в ряде регионов России допустимое время ремонта в многоквартирных домах продлевается до восьми часов вечера, а работы с легко воспламеняемыми и горючими материалами должны осуществляться не позже 16:00 в будние дни.

Кроме того, во многих населенных пунктах Российской Федерации суббота не считается выходным днем для производства шумного переоборудования жилплощади.

Начинать шумные работы можно не раньше девяти утра

Другие важные моменты ремонта в квартире по закону

Кроме требований ко времени суток, в жилых зданиях существует ряд других ограничений, касающихся проведения строительно-отделочных работ. Так, независимо от сложности предприятия и объема задач, нельзя проводить ремонт больше трех месяцев. При этом обустройство частной собственности не должно причинять материальный ущерб смежным помещениям.

Отдельные требования действуют для подъездных площадок и лифтов. Так запрещается загромождать мусором и строительными материалами лестничные клетки и пути эвакуации на случай чрезвычайной ситуации. А пассажирские подъемные кабины не допускается использовать для вывоза стройматериалов и отходов, не имеющих упаковки.

[vimeoyoutubepopup_video displaytype=»image» videoplayer=»youtube» videoid=»QUL0zKWYgKc» text=»Взаимодействие с соседями во время шумных работ» autoplay=»true»]

Также санитарно-эпидемиологической службой нормируется порог уровня вибрации и шума. В многоквартирных домах предельное значение не должно превышать 40 децибел. Если используется более шумное оборудование, то жильцы могут подать жалобу на нарушителя, за что предусмотрена административная ответственность в виде предупреждения (в случае несистематических нарушений) или штрафа.

Юридические моменты осуществления ремонтной деятельности стали сегодня головной болью не только для многих жильцов многоквартирных домов, но и для самих мастеров. Однако нельзя забывать, что такое сооружение — общественный объект, где проживает множество людей. Поэтому все собственники квартир этого здания должны быть взаимно вежливы и осуществлять ремонт в квартире по закону.

Добропорядочные отношения с соседями могут существенно облегчить и ускорить отделку квартиры. К примеру, если владельцу новой квартиры удалось собрать подписи жильцов о том, что они не будут против проведения строительных работ в неустановленное время, то он может смело воплощать свои дизайнерские идеи раньше 8:00. И ему не нужно будет беспокоиться по поводу того, до скольки можно делать ремонт в квартире.

О дополнительном времени проведения шумных работ можно договориться с соседями

Однако нужно быть готовым к отказу. Ведь у некоторых могут быть маленькие дети, а кто-то трудится в ночную смену и не может отдохнуть в шуме. Поэтому, если соседи ответили «нельзя», ремонт придется осуществлять только в регламентированные временные промежутки.

чтобы не поссориться с партнером во время ремонта, сделайте 5 простых шагов

Это история из Сообщества. Редакция задала наводящие вопросы, бережно отредактировала и оформила по стандартам журнала.

Мы с партнером пока не в браке, поэтому к идее совместного ремонта квартиры я поначалу отнеслась скептически.

Случается, что после этого распадаются даже женатые пары. Мы хотели сделать ремонт, чтобы было проще продать квартиру, а бюджет был ограничен — всего 200 000 Р. Приходилось искать компромиссы и многое делать своими руками.

Ремонт действительно стал для нас испытанием в отношениях. Но нам удалось не поссориться в процессе. Расскажу, как этого добиться.

Шаг 1

Заранее спланировать дизайн интерьера и найти компромиссы

Именно на стадии планирования дизайна выясняется, чего каждый из членов семьи ожидает от готового жилья. Мне было важно, чтобы все элементы интерьера смотрелись единым ансамблем, выглядели стильно и визуально увеличивали пространство. Поэтому я настаивала на молочно-белых полах и обоях нежных оттенков — чтобы в помещениях было светло. Арсений же хотел деревянные элементы в дизайне, рейки и даже акцентную стену из вагонки. Для него было важно получить интерьер с отсылками к живой природе, ее натуральным текстурам.

В итоге нашли компромисс — ламинат с узорами «под дерево», который мы постелили на полу в жилых комнатах. Отделывать стены гостиной и спальни мы решили светло-розовыми и голубыми обоями соответственно.

В кухне и коридоре Арсений предлагал уложить на пол линолеум, но мне казалось, что керамическая плитка будет уместнее. Тут тоже нашли компромисс: выбрали виниловую доску с текстурой ламината. Этот материал монтируется на клей, он экологичен, и у него хорошие водоотталкивающие свойства. На кухне и в коридоре это важно.

Из подобных компромиссов и состоит планирование ремонта — когда дизайнерские задумки учитывают не только желание каждого из партнеров, но и технические аспекты реализации, а также бюджет.

Текстура ламината в отремонтированной спальне Промежуточный этап ремонта в гостиной. Отремонтирован пол и уложен ламинат

НОВЫЙ КУРС

Как сделать ремонт и не сойти с ума

Разбираемся, как начать и закончить ремонт без переплат: от проекта до приемки

Покажите!

Шаг 2

Определиться со стилем

Если бы мы обратились к опытному дизайнеру, нам удалось бы избежать многих споров. Однако мы не стали привлекать специалиста, так как были ограничены в бюджете и хотели попробовать свои силы в создании интерьера.

Существует заблуждение, что оформление интерьера нужно доверить женщине, а мужчина не должен вмешиваться. Однако мнение мужчины также должно учитываться. Чтобы каждый привнес в интерьер свои детали и у человека было ощущение родного дома.

Дизайн мы подбирали в свободное время, когда никто из нас не был уставшим, раздраженным и не вернулся с работы недавно. В противном случае мы начинали спорить и дело могло закончиться ссорой.

Начали с поиска решений на «Пинтересте». Идеи для декора представлены там в виде подборок. И даже после того, как перестаешь вбивать в поисковик ключевые слова, программа продолжает снабжать тебя свежими картинками по теме.

Фотографии с понравившимися идеями мы сохраняли в отдельную папку на компьютере. Искали в интернете готовые, уже продуманные варианты комнат. Если нет возможности нанять дизайнера, лучше делать именно так. Когда собираешь дизайн по кусочкам, велик риск, что на выходе получится чудовище Франкенштейна — набор несочетаемых элементов, вычурный и даже вульгарный интерьер.

Палетки и палитры с сочетаниями цветов тоже можно найти в интернете — так вы будете уверены, что цвета, выбранные для помещений, не будут резать взгляд.

Мебель по нашей задумке тоже должна была гармонировать с помещением. Например, я перекрасила старый советский шкаф в темно-розовый цвет, а комод — в синий: его поставим в комнату, где будут преобладать голубые оттенки.

Недавно я искала идеи для оформления ванной с дубовой бочкой вместо раковины. После этого «Пинтерест» предложил мне почистить ленту и наполнить ее актуальными для меня подборками Отреставрированный в стиле бохо шкаф. В этой стилистике мебель искусственно состаривается, на нее наносится «налет времени» — благородная патина — чаще под серебро, золото или медь. Для шкафа в пару к бежево-розовому я выбрала серебристый колер, а для комода в пару к сине-голубому — золотой Идеи и технические моменты реализации авторской мебели в стиле бохо я подсмотрела в роликах на «Ютубе»

Шаг 3

Составить смету

До начала работ лучше составить смету — это касается как дизайнерского этапа, так и технического. В ней можно прикинуть стоимость материалов без учета сезонных или временных скидок. И следует накинуть еще 5—15% к получившейся сумме, чтобы учесть инфляцию и непредвиденные расходы.

Как показывает практика, нередко именно из-за бюджета возникают разногласия во время ремонта. Поэтому важно прислушиваться к доводам партнера.

Например, чтобы сэкономить 3000 Р, я предлагала взять на шесть секций радиатора меньше, чем предлагал Арсений. Но приняла во внимание его аргумент: лучше сделать отопление как надо, и тогда можно будет отказаться от утепления стен.

Мы сели и посчитали этот этап: утепление минеральной ватой 24 м² внешних стен обошлось бы нам в 16 800 Р. Помимо этого, толщина утеплителя съела бы часть полезного пространства — а наша квартира и без того небольшая. В итоге экономия вышла бы сомнительной.

Обычно семейный бюджет ограничен, поэтому мы сразу распределили, куда и на что потратим деньги. Если стоимость ремонта выбивается из бюджета, можно ремонтировать все постепенно или временно отказаться от части работ. Жить в квартире, где везде идет ремонт, сложно психологически: будет раздражать вечная неустроенность и грязь.

Шаг 4

Избавиться от старого ремонта и не расстраиваться на промежуточных этапах

Когда мы взялись за ремонт, я поняла, что 30—50% трудозатрат — демонтаж, вынос мусора и уборка. Это рутинные и неинтересные работы, но без них не приступить к остальным.

Именно с демонтажа старого и начинаются изменения в квартире или доме. И на этом этапе помещения начинают выглядеть значительно хуже, чем до вмешательства.

Это почти всегда расстраивает: кажется, что уродуешь квартиру, оставляешь ее голой, серо-зеленой, с дырками в стенах. Кроме того, любой демонтаж — это много мелкой пыли, крошек бетона, дерева и краски на полу, которые приходится убирать.

Арсений демонтировал двери и дверные коробки за пару дней, а я снимала слои старых обоев, чтобы убедиться, что стене не требуется обработка против грибка, — это заняло около трех недель. Отходы мы выносили сами, поэтапно. Мелкий мусор вроде отколовшихся кусков бетонной стены складывали в строительные мешки, а крупный вроде частей дверных коробок Арсений сматывал малярным скотчем и выносил связкой. Так быстрее начинало казаться, что квартира освобождается.

Мы работали параллельно с разными стенами или в разных комнатах, чтобы не мешать друг другу. И заранее договаривались, кто и что будет делать, за какие работы возьмемся на следующем этапе. Это позволяло не расстраиваться из-за медленно продвигающегося ремонта.

Так выглядели стены, с которых уже сняли обои. После демонтажа дверной коробки обнажились деревянные перекрытия, покрытые бетоном. Получившуюся дыру мы выровняли куском гипсокартона, вырезанным по размеру разверзшегося отверстия, и прикрепили гипсокартон на клей А здесь мы увидели серо-желтые стены. Столько мусора остается всего от 2—3 м² очищенной от обоев стены

Шаг 5

Выбрать бригаду исполнителей и делегировать сложные работы

Некоторые этапы в ремонте сложны в исполнении и требуют профессиональной квалификации. Например, сложно самостоятельно справиться с проводкой или уложить плитку.

Мы пользовались услугами профессиональных бригад, чтобы заменить батареи, проводку и трубы отопления. Так нам не пришлось покупать лишний инструмент и удалось сохранить свои нервы.

Цены у электриков указываются приблизительные. Они формируются, исходя из суммы факторов: перекрытия стен, года постройки дома и особенностей электрического щитка. Фиксированная цена у электриков только за штробу — проделывание в стене канавки под провод. В нашем случае одна штроба стоила 900 Р Мы хотели сэкономить, и бригадир электриков предложил мне самой сделать план электрической разводки. Начертила его от руки

Замена товара на время ремонта \ Акты, образцы, формы, договоры \ Консультант Плюс

]]>

Подборка наиболее важных документов по запросу Замена товара на время ремонта (нормативно–правовые акты, формы, статьи, консультации экспертов и многое другое).

Статьи, комментарии, ответы на вопросы: Замена товара на время ремонта Открыть документ в вашей системе КонсультантПлюс:
«Информационное право: возрастная маркировка, цифровая безопасность и другие вопросы»
(выпуск 20)
(Тарасенкова А. Н.)
(«Редакция «Российской газеты», 2019)Неустойка (пеня) в размере 1% цены товара (ст. 23 Закона о защите прав потребителей) взыскивается за каждый день просрочки сроков возмещения причиненных потребителю убытков вследствие предоставления ненадлежащей информации о товаре, а также за каждый день задержки выполнения требования потребителя о предоставлении ему на время ремонта (либо до замены товара с недостатками) товара длительного пользования, обладающего этими же основными потребительскими свойствами, вплоть до выдачи потребителю товара из ремонта (или его замены) либо до предоставления во временное пользование товара длительного пользования, обладающего указанными потребительскими свойствами. Сумма при этом не ограничена. Более того, если продавец, изготовитель (уполномоченная фирма или предприниматель) нарушили несколько сроков, скажем, не предоставили необходимую информацию, нарушили срок для устранения недостатков или замены товара, не выполнили или несвоевременно выполнили требование о предоставлении во временное пользование товара длительного пользования, обладающего этими же основными потребительскими свойствами, то неустойка (пеня) взыскивается за каждое допущенное нарушение без погашения одного другим.

Нормативные акты: Замена товара на время ремонта Постановление Пленума Верховного Суда РФ от 28.06.2012 N 17
«О рассмотрении судами гражданских дел по спорам о защите прав потребителей»а) неустойка (пеня) в размере, установленном статьей 23 Закона, взыскивается за каждый день просрочки указанных в статьях 20, 21, 22 Закона сроков устранения недостатков товара и замены товара с недостатками, соразмерного уменьшения покупной цены товара, возмещения расходов на исправление недостатков товара потребителем, возврата уплаченной за товар денежной суммы, возмещения причиненных потребителю убытков вследствие продажи товара ненадлежащего качества либо предоставления ненадлежащей информации о товаре, а также за каждый день задержки выполнения требования потребителя о предоставлении на время ремонта либо до замены товара с недостатками товара длительного пользования, обладающего этими же основными потребительскими свойствами, впредь до выдачи потребителю товара из ремонта или его замены либо до предоставления во временное пользование товара длительного пользования, обладающего этими же основными потребительскими свойствами, без ограничения какой-либо суммой. При этом судам надлежит учитывать, что если срок устранения недостатков не был определен письменным соглашением сторон, то в соответствии с пунктом 1 статьи 20 Закона недостатки должны быть устранены незамедлительно, то есть в минимальный срок, объективно необходимый для устранения данных недостатков товара с учетом обычно применяемого способа их устранения. Приказ МАП РФ от 20.05.1998 N 160
(ред. от 11.03.1999)
(Зарегистрировано в Минюсте РФ 28.12.1998 N 1669)Неустойка (пеня) в размере, установленном статьей 23 Закона «О защите прав потребителей», взыскивается за каждый день просрочки установленных статьями 20, 21, 22 Закона «О защите прав потребителей» сроков выполнения требований потребителя об устранении недостатков товара, замене товара с недостатками, о соразмерном уменьшении покупной цены товара, возмещении расходов на исправление недостатков товара потребителем или третьим лицом, о возмещении убытков, причиненных потребителю расторжением договора купли — продажи (возвратом товара ненадлежащего качества изготовителю), а также за каждый день задержки выполнения требования потребителя о предоставлении на период ремонта (замены) аналогичного товара длительного пользования впредь до выполнения соответствующего требования потребителя без ограничения какой-либо суммой.

Ремонт квартир в СПб под ключ, цены на отделку помещений.

Компания «Время ремонта» более 10 лет производит ремонт квартир и офисов в Санкт-Петербурге.

Наши достижения:

Наши преимущества:

Любые площади и сложность

Специалисты-славяне с профильным образование

Современные материалы и оборудованием

Индивидуальный подход

Адекватные цены

Соблюдение сроков

Фиксированная стоимость

Безопасность работ

Не заплатив ни рубля, вы уже получаете:

Вызов мастера

Замеры

Составление сметы

Консультации по материалам

Закупка и доставка материалов

Проведение товара по скидочным картам

Организация работы с ТСЖ

Честная цена

Вы заплатите ровно столько, сколько стоит работа квалифицированного и опытного персонала, использующего профессиональное оборудование.

Как мы работаем?

От вас потребуется минимум усилий. Вот схема работы:

Вызов мастера, замеры, смета

Договор и закупка материалов

Проведение работ с поэтапной оплатой

Сдача объекта

Примеры работ.

Ремонт квартиры «под ключ»

наиболее удобен по следующим причинам:

  • позволяет оформить интерьер в одном стиле, разработать единый дизайн;
  • получить от нашей компании скидки на укладку напольных покрытий, «от объёма работ» и другие, в зависимости от проводимых акций;
  • сделать всё за раз и уже не возвращаться к этому вопросу.

Вы получите полный набор услуг по комплексному ремонту всех помещений квартиры и не будете попадать из нового коридора в исчерпавшие себя спальню или кухню.

Только профессиональное оборудование

Ремонт квартир наших клиентов осуществляется современным инструментом в исправном состоянии. За счёт этого мы экономим время проведения работ, минимизируем расход материалов и оказываем услуги, отвечающие технике безопасности и текущим стандартам качества. Это одна из важнейших причин, почему ремонт коммерческих помещений или квартир необходимо заказывать у солидных фирм, которые могут позволить дорогостоящее оборудование.

Только квалифицированный персонал

Весь штат сотрудников не раз проверен технически трудными проектами и сложными дизайнерскими решениями. Вместо перечисления достоинств предлагаем ознакомиться с разделом Портфолио, который даст представление о возможностях нашей команды, выполняющей ремонт квартир любой площади, планировки и нагруженности элементами архитектурной составляющей.

Руководящий состав

Дмитрий,
директор по строительству

Марина,
дизайнер

Родион,
производитель работ

Александр,
производитель работ

За материал можете не беспокоиться

Многих людей пугает огромный выбор строительных материалов с кучей понятных и не очень характеристик, на изучение которых требуется много сил и времени. Хочется выбрать надёжные, долговечные материалы по приемлемой цене. Но когда перед вами стеллажи с тысячами наименований сотен производителей, невольно хочется развернуться и уйти из магазина. Или ещё печальней, когда уже купленные материалы «А» и «Б» взаимоисключаемы или требуют специальных инструментов и технологии …

В этой ситуации вам на помощь придут наши мастера, ежедневно проводящие ремонт квартир и закупку стройматериалов. Уже на стадии осмотра помещений или проектирования дизайна наш человек подскажет или сам выберет нужного производителя и ближайший магазин с лучшей ценой. После составления сметы и подписания договора, мы сами закупим по скидочным картам и привезём всё необходимое, а вам достанется наслаждаться результатом, когда уже всё будет на своём месте.

Скидки и бонусы от наших партнёров

Любая хорошая компания, осуществляющая ремонт коммерческих помещений и квартир, поможет клиенту с покупкой и выполнит установку сопутствующих предметов интерьера, например, дверей, мебели, окон. Так и у нас имеются партнёрские соглашения с некоторыми надёжными и авторитетными производителями, плюс к этому мы всегда знаем, у кого можно брать, а кто может подвести по качеству или срокам.

Если вас заинтересовал

ремонт отдельных помещений или квартир под ключ в Санкт-Петербурге, позвоните нам по номеру 812 984-1-985 и мы подберём оптимальный набор услуг по выгодной цене. Спешите вложить свой капитал в ежедневное счастье, наслаждение и радость для глаз — любимое жильё!

Время проведения шумных работ во время ремонта / Студия дизайна 3D-СТИЛЬ

Ремонтные работы без нарушения закона

Если в квартире начался ремонт, то в доме постоянно слышится шум и грохот. Эти неприятные звучания рабочих инструментов действуют раздражающе на рядом живущих людей. Нередко возникают ссоры и недовольство соседей. Поэтому приступая к ремонту, владелец несет ответственность за порядок в доме.

Следует заранее определиться, когда начинать ремонт, выбрать определенное время, чтобы браться за благоустройство своей квартиры, соблюдая при этом все нормы законодательства. При этом возникает масса проблем, и враждебный настрой соседей. Мы постараемся вам подсказать, как их избежать.

Закон РФ о ремонте в квартире — что нужно знать?

Прежде чем приступать к ремонту жилья, следует тщательно изучить закон РФ, а он гласит:

1 Владельцу запрещается заниматься ремонтом в квартире в дни отдыха и праздники, если они считаются государственными.

2. Устанавливается график проводимых работ. Он должен владельцем квартиры строго соблюдаться во избежание ссоры с соседями. Допускается начинать ремонт в 10.00 утра и завершать в 19.00, не позже. В некоторых регионах закон РФ о ремонте квартир допускает проводить работы по ремонту квартиры до 22.00.

3. Продолжительность рабочего дня составляет 6 часов, не больше. Но существует исключение, если ведутся сложные работы, например, электропроводка. В этом случае устраивается небольшой перерыв. Только в новостройках все отделочные проводятся с 7.00 утра и до 23.00 ночи без перерыва.

4. По закону время проведения ремонтных работ в общественных домах составляет три месяца.

5. Существует положение о шумовом уровне, оно равно 40 дБ, не более. Все строительные инструменты, которые издают сильный шум и обладают вибрационным эффектом, превышающие установленные нормы использовать запрещено. При нарушении данного закона вас могут привлечь к административной ответственности.

6. Владельцам жилья запрещено ломать стены между смежными помещениями. Если в проект ремонта входят такие изменения, следует в обязательном порядке согласовать свои действия с соседями и получить их согласие, чтобы избежать в дальнейшем конфликтов.

7. Строго следить за уборкой мусора и строительных отходов, чтобы не загромождать лестничную площадку и доступ жильцов к лифту. В домах должны быть все условия в случае опасности для экстренной эвакуации.

8. Правильно использовать общественный лифт для перевозки строительных материалов, их должны перевозить в особых упаковках.

9. Проведение ремонта в неурочное время необходимо согласовать с соседями, а также получить их письменное согласие. Это даст возможность вам без конфликта вести ремонтные работы в квартире.

Положение о превышении шума

Наша статья ознакомила вас с основным положением закона о ведении ремонта в квартире жилого дома. Мы готовы проанализировать некоторые из них подробнее. По мнению юристов, превышать уровень шума нельзя, т.к. это является нарушением закона РФ о ремонте, а также санитарных норм. Существует закон «О тишине», где данный факт считается нарушением гражданского порядка.

Например, шум в 40 дБ воспринимается как и в 50 дБ легко, и не вызывает раздражения. Данный пример показывает, что шумовой эффект для каждого из нас является приемлемым, если составляет от 30 дБ до 60 дБ. Поэтому сильный шум от ремонта по закону относится к мелкому хулиганству. А значит, чтобы недобросовестный жилец дома нес административную ответственность, необходимо измерить уровень шума. Затем, в случае его превышения, составить протокол и призвать владельца к ответственности.

Закон о ремонте квартиры в дни отдыха

Действующий закон о ремонте квартиры в выходные дни гласит, что заниматься шумными работами в этот период допустимо лишь после получения согласия от соседей. Категорически запрещается в такие дни делать реконструкцию, то есть устанавливать перегородки или сносить стены в квартире. Если ремонтники все-таки злоупотребляют и нарушают ваш отдых, проводя ремонт, есть несколько способов, чтобы найти выход из сложившейся ситуации:

1. Для начала попробуйте договориться, чтобы они вели себя тише. Позвоните или нанесите визит.

2. Если после разговора шум ремонтных работ у соседа продолжается, следует вызвать милицию.

3. Если работы ведутся, и шум не прекращается, составьте заявление, также попросите соседей его подписать и отправьте его участковому. Представитель закона должен предупредить нарушителей тишины или наложить штраф за их незаконные действия.

Необходимые действия перед началом ремонтных работ

1. Ознакомиться с положением о проведении ремонтных работ в жилом доме. Следует знать показатели нормы шума, установленные для вашего региона.

2. Точно знать время, установленное для ведения шумных работ, и строго соблюдать его.

3. Согласовать с соседями свои действия, чтобы не вызывать недовольство от шума производимых работ.

4. Еще один вариант — через суд решить свои проблемы. Следует предоставить перечень документов, это — акт, составленный о нарушении тишины, список жильцов, которые живут в шумной квартире. Также послужит подтверждением нарушения положение о тишине аудио- или видеозапись шума и протоколы, которые предоставила милиция.

5. Если владелец проводит незаконную перепланировку в своей квартире, действия которого не подтверждены соответствующими органами — следует обратиться в ЖЭК. Такое нарушение грозит штрафными санкциями, в худшем случае — выселением.

Надеемся, что вы из нашей статьи узнали о федеральном законе проведения ремонта в квартире, действующем на территории России. А значит, это поможет избежать конфликтов при проведении преобразования своей квартиры. Успех во многом будет зависеть от ваших действий. Продумывая всевозможные способы, можно решить разные спорные вопросы, возникающие на каждом этапе ремонтных работ.

Только правильное распределение своего времени, соблюдение всех норм, предусмотренных законодательством, поможет вам успешно сделать ремонт в доме, и избежать всех проблем. Естественно, обстоятельства возникают разные, но только умение слушать и понимать окружающих вас людей помогут успешно заниматься ремонтными работами.

FAM72A противодействует UNG2, способствуя мутагенной репарации во время созревания антител

  • Muramatsu, M. et al. Для рекомбинации и гипермутации с переключением класса требуется индуцированная активацией цитидиндезаминаза (AID), потенциальный фермент редактирования РНК. Cell 102 , 553–563 (2000).

    КАС Статья Google ученый

  • Фэн, Ю., Сейя, Н., Дж. М., Д. И. Н. и Мартин, А. AID в диверсификации антител: туда и обратно. Тренды Иммунол. 41 , 586–600 (2020).

    КАС Статья Google ученый

  • Cascalho, M., Wong, J., Steinberg, C. & Wabl, M. Репарация несоответствия, кооптированная путем гипермутации. Наука 279 , 1207–1210 (1998).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google ученый

  • Di Noia, J. & Neuberger, M.S. Изменение пути гипермутации иммуноглобулина путем ингибирования урацил-ДНК-гликозилазы. Природа 419 , 43–48 (2002).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья Google ученый

  • Рада, г., Di Noia, JM & Neuberger, M.S. Распознавание несоответствия и удаление урацила обеспечивают дополнительные пути как для переключения Ig, так и для фазы соматической мутации, ориентированной на A / T. Мол. Ячейка 16 , 163–171 (2004).

    КАС Статья Google ученый

  • Рада, К. и др. Переключение изотипа иммуноглобулина ингибируется, а соматическая гипермутация нарушается у мышей с дефицитом UNG. Курс. биол. 12 , 1748–1755 (2002).

    КАС Статья Google ученый

  • Мурамацу, М. и др. Специфическая экспрессия индуцированной активацией цитидиндезаминазы (AID), нового члена семейства дезаминаз, редактирующих РНК, в В-клетках зародышевого центра. Дж. Биол. хим. 274 , 18470–18476 (1999).

    КАС Статья Google ученый

  • Lawson, K.A. et al. Функциональный геномный ландшафт присущего раку уклонения от уничтожения Т-клетками. Природа 586 , 120–126 (2020).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google ученый

  • Pan-Hammarstrom, Q. et al. Влияние ДНК-лигазы IV на пути негомологичного соединения концов во время рекомбинации переключения классов в клетках человека. Дж. Экспл. Мед. 201 , 189–194 (2005).

    Артикул Google ученый

  • Ward, I.M. et al. 53BP1 требуется для рекомбинации переключателей классов. J. Cell Biol. 165 , 459–464 (2004).

    КАС Статья Google ученый

  • Yan, C. T. et al. Переключение класса IgH и транслокации используют надежный неклассический путь соединения концов. Природа 449 , 478–482 (2007).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google ученый

  • Перес-Дюран, П. и др. UNG формирует специфичность соматической гипермутации, вызванной AID. Дж. Экспл. Мед. 209 , 1379–1389 (2012).

    КАС Статья Google ученый

  • Фридер Д., Лариджани М. , Коллинз К., Шульман М.и Martin, A. Согласованное действие Msh3 и UNG стимулирует соматическую гипермутацию в парах оснований AT. Мол. Клетка. биол. 29 , 5148–5157 ​​(2009).

    КАС Статья Google ученый

  • Thientosapol, E. S. et al. Близость к последовательностям AGCT диктует MMR-независимые по сравнению с MMR-зависимыми механизмы для AID-индуцированной мутации через UNG2. Рез. нуклеиновых кислот. 45 , 3146–3157 (2017).

    КАС пабмед Google ученый

  • Мартин, А. и др. Активность АТФазы Msh3 необходима для соматической гипермутации в парах оснований AT и для эффективной рекомбинации переключения классов. Дж. Экспл. Мед. 198 , 1171–1178 (2003).

    КАС Статья Google ученый

  • Phung, Q. H. et al. Повышенная гипермутация нуклеотидов G и C в вариабельных генах иммуноглобулина у мышей с дефицитом белка репарации несоответствия MSh3. Дж. Экспл. Мед. 187 , 1745–1751 (1998).

    КАС Статья Google ученый

  • Delbos, F., Aoufouchi, S., Faili, A., Weill, J.C. & Reynaud, C.A. ДНК-полимераза eta является единственным фактором, влияющим на модификации A/T во время гипермутации гена иммуноглобулина у мыши. Дж. Экспл. Мед. 204 , 17–23 (2007).

    КАС Статья Google ученый

  • Аракава, Х., Saribasak, H. & Buerstedde, JM. Индуцированная активация цитидиндезаминазы инициирует преобразование гена иммуноглобулина и гипермутацию с помощью общего промежуточного соединения. PLoS Биол. 2 , Е179 (2004).

    Артикул Google ученый

  • Кампо В.А. и др. Дефицит MSH6 или PMS2 вызывает повторную репликацию в В-клетках DT40, но мало влияет на конверсию гена иммуноглобулина или на репарацию урацилов, продуцируемых AID. Рез. нуклеиновых кислот. 41 , 3032–3046 (2013).

    КАС Статья Google ученый

  • Ди Нойя, Дж.М., Рада, К. и Нойбергер, М.С. SMUG1 способен вырезать урацил из генов иммуноглобулина: понимание мутации по сравнению с восстановлением. EMBO J. 25 , 585–595 (2006).

    Артикул Google ученый

  • Капелли, Э.и другие. Скорость эксцизионной репарации оснований зависит не только от уровней инициирующих ферментов. Канцерогенез 22 , 387–393 (2001).

    КАС Статья Google ученый

  • Krusong, K., Carpenter, E.P., Bellamy, S.R., Savva, R. & Baldwin, G.S. Сравнительное исследование урацил-ДНК-гликозилаз человека и вируса простого герпеса типа 1. J. Biol. хим. 281 , 4983–4992 (2006 г.).

    КАС Статья Google ученый

  • Krokan, H. E. et al. Связь безошибочной и мутагенной обработки геномного урацила с раком. Восстановление ДНК 19 , 38–47 (2014).

    КАС Статья Google ученый

  • Zeng, X. et al. ДНК-полимераза эта представляет собой АТ-мутатор при соматической гипермутации вариабельных генов иммуноглобулина. Нац.Иммунол. 2 , 537–541 (2001).

    КАС Статья Google ученый

  • Бельчева А. и др. Метаболизм микробов кишечника стимулирует трансформацию MSh3-дефицитных эпителиальных клеток толстой кишки. Cell 158 , 288–299 (2014).

    КАС Статья Google ученый

  • Рамачандран, С. и др. Модуль деубиквитинирования SAGA способствует репарации ДНК и рекомбинации переключения классов посредством образования γh3AX, опосредованного ATM и DNAPK. Cell Rep. 15 , 1554–1565 (2016).

    КАС Статья Google ученый

  • Сарно, А.и другие. Вариант изоформы урацил-ДНК-гликозилазы UNG1 поддерживает рекомбинацию переключения класса и восстанавливает ядерный геномный урацил. Рез. нуклеиновых кислот. 47 , 4569–4585 (2019).

    КАС Статья Google ученый

  • Li, C. et al. Деубиквитиназа h3B Usp22 способствует рекомбинации переключения класса антител, облегчая негомологичное соединение концов. Нац. коммун. 9 , 1006 (2018).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ Статья Google ученый

  • Ли, К. и другие. Программирование идентичности стромальных клеток брыжеечных лимфатических узлов в раннем возрасте с помощью пути лимфотоксина регулирует иммунитет слизистой оболочки взрослых. Науч. Иммунол. 4 , aax1027 (2019).

    Артикул Google ученый

  • Лю, М. и др. Два уровня защиты генома В-клеток при соматической гипермутации. Природа 451 , 841–845 (2008).

    ОБЪЯВЛЕНИЕ КАС Статья Google ученый

  • Сиривардена, С.U., Perera, MLW, Senevirathne, V., Stewart, J. & Bhagwat, AS. Опухолестимулирующий эфир форбола вызывает значительное увеличение экспрессии APOBEC3A и умеренное увеличение экспрессии APOBEC3B в нормальной клеточной линии кератиноцитов человека без увеличения геномной урацилы. Мол. Клетка. биол. 39 , e00238-18 (2019).

    КАС Статья Google ученый

  • Boulianne, B. et al. AID-экспрессирующие В-клетки зародышевого центра обычно кластеризуются в фолликулах лимфатических узлов в отсутствие FDC M1 + CD35 + фолликулярных дендритных клеток, но преждевременно диссипируют. Дж. Иммунол. 191 , 4521–4530 (2013).

    КАС Статья Google ученый

  • Метаболизм митохондрий координирует стадийные процессы восстановления в макрофагах во время заживления ран

    https://doi.org/10.1016/j.cmet.2021.10.004Get rights and content

    Провоспалительные макрофаги раны характеризуются продукцией mtROS и стабилизацией HIF1α

    Этот молекулярный процесс необходим для правильной васкуляризации во время раны. восстановление

    Макрофаги, способствующие разрешению, отмечены митохондриальным дыханием и митогормезисом клетки.Изменения в клеточном метаболизме, вероятно, определяют эти различные активности, но природа этих изменений остается неясной. Здесь мы профилировали макрофаги кожных ран на ранней и поздней стадиях у мышей как на транскрипционном, так и на функциональном уровнях. Мы обнаружили, что гликолитического метаболизма на ранней стадии недостаточно для обеспечения продуктивной репарации. Вместо этого, сочетая условное нарушение цепи переноса электронов с делецией митохондриальной аспартил-тРНК-синтетазы с последующим анализом последовательности отдельных клеток, мы обнаружили, что субпопуляция раневых макрофагов на ранней стадии характеризуется продукцией митохондриальных АФК (мтАФК) и HIF1α. стабилизация, которая в конечном итоге запускает проангиогенную программу, необходимую для своевременного заживления.Напротив, макрофаги раны в поздней фазе, способствующие рассасыванию, характеризуются IL-4Rα-опосредованным митохондриальным дыханием и митогормезисом. В совокупности мы идентифицируем изменения в митохондриальном метаболизме как критический механизм контроля эффекторных функций макрофагов во время заживления ран.

    Ключевые слова на русском:

    Ключевые слова

    Ключевые слова на русском:

    ключевые слова

    рана заживление

    Monocyte / MacroОфаг

    MitoChyte / MACROSHAGE

    Mitochondria

    Mitochondrial Repurplosing

    Тип 2 Immunity

    MitoHormesise

    Рекомендуемая стационарные изделия (0)

    Данные и код Доступности

    Данные RNA-Seq и scRNA-Seq были депонированы в GEO и общедоступны на дату публикации.Регистрационные номера: NCBI GEO: GSE157291; ГЕО NCBI: GSE183488, ГЕО NCBI: GSE183489. Оригинальные изображения вестерн-блоттинга, данные проточной цитометрии и данные микроскопии, представленные в этой статье, будут переданы ведущим контактным лицом по запросу.

    В этом документе не указан исходный код.

    Любую дополнительную информацию, необходимую для повторного анализа данных, представленных в этом документе, можно получить по запросу у ведущего контактного лица.

    © 2021 Авторы.Опубликовано Elsevier Inc.

    Рекомендуемые статьи

    Ссылки на статьи

    Frontiers | Выбор пути репарации (отсутствия) двухцепочечного разрыва ДНК во время рекомбинации V(D)J

    Вступительные замечания

    Целостность генома клетки постоянно находится под угрозой со стороны экзогенных или эндогенных факторов, вызывающих повреждения ДНК различной природы, которые могут воздействовать на одного нуклеотида или привести к повреждению остова ДНК. Независимо от типа или обстоятельств, приводящих к повреждению ДНК, оно должно надежно обнаруживаться, сигнализироваться и восстанавливаться, что в идеале приводит к отсутствию или минимальным изменениям генетического кода и восстановлению неповрежденного генома.Клетки млекопитающих снабжены несколькими наборами молекулярных инструментов, гарантирующих эффективную репарацию поврежденной ДНК, при этом природа повреждения ДНК во многом диктует выбор аппарата репарации. Тем не менее, существует несколько путей репарации ДНК для одного типа повреждений, например, в случае исправления двухцепочечных разрывов ДНК (DSB). DSB ДНК часто рассматриваются как наиболее опасная форма повреждения ДНК для клетки, приводящая к физическому разделению молекул ДНК. Неспособность точно восстановить DSB может привести к гибели клеток или структурным изменениям ДНК ( i.e., потеря генетического материала, изменение последовательности или соединение не той пары концов ДНК, приводящее к хромосомным транслокациям), которые потенциально могут вызвать канцерогенез или возникновение патологий, включая нейродегенеративные заболевания или иммунодефициты (Mitelman et al., 2007; Jackson and Bartek, 2009). ; Ciccia and Elledge, 2010; Goldstein and Kastan, 2015). Возможно, по опрометчивости иммунная система использовала поломку хромосом как неотъемлемую часть развития В- и Т-клеток, когда V(D)J-рекомбинация — запрограммированный процесс перестройки ДНК — генерирует огромное количество молекул антигенных рецепторов. Рекомбинация V(D)J инициируется, когда лимфоидно-ограниченные гены RAG1 и RAG2 , активирующие рекомбинацию, экспрессируются и образуют сайт-специфическую эндонуклеазу (нуклеазу RAG или рекомбиназу RAG), которая индуцирует DSB внутри Т-клеточного рецептора (TCR). , α/δ, β, γ) и локусы генов Ig (h, κ, λ). Несмотря на существование множества путей репарации DSB, включая пути канонического негомологичного соединения концов (NHEJ) и гомологичной рекомбинации (HR), а также дополнительных (микро)гомологически направленных подпутей, RAG-инициированные DSB являются «почти» ремонтируется исключительно NHEJ.В следующем обзоре мы рассмотрим различные параметры, которые ограничивают выбор пути репарации DSB ДНК в лимфоцитах, подвергающихся рекомбинации V (D) J, и обсудим, как NHEJ-опосредованная репарация влияет на успешную сборку генов антигенных рецепторов или связь с иммунодефицитами и лимфоидным раком.

    Рекомбинация V(D)J и репарация двухцепочечных разрывов

    Рекомбинация V(D)J представляет собой процесс перестройки гена соматического антигенного рецептора, происходящий в развивающихся В- и Т-клетках, включающий перестройку V (вариабельный), D (разнообразный) и J (объединение) генных сегментов, расположенных внутри локуса Ig или TCR (рис. 1А) (рассмотрено в (Gellert, 2002; Litman et al., 2010; Шац и Джи, 2011 г.; Рот, 2014; Lescale and Deriano, 2016)). Эта специфичная для локуса реакция инициируется нуклеазой RAG, которая вводит два DSB в сигнальные последовательности рекомбинации (RSS), фланкирующие выбранные сегменты V, D и J. RAG-DSB представляют угрозу для общей стабильности генома, поэтому активность рекомбиназы RAG строго контролируется (Roth, 2003; Roth, 2014; Lescale and Deriano, 2016).

    РИСУНОК 1 . Рекомбинация V(D)J и основы NHEJ: создание разнообразия антигенных рецепторов. (A) Рекомбинация V(D)J в локусе тяжелой цепи иммуноглобулина (изображена в качестве примера) состоит в последовательной двухступенчатой ​​перестройке сегментов V, D и J. Этот комбинаторный процесс порождает разнообразие антигенных рецепторов. (B) После расщепления RAG путь репарации NHEJ инициируется путем связывания гетеродимера Ku70/80 (Ku) с концами ДНК. Ku вместе с DNA-PKcs образуют холофермент ДНК-PK. Затем концы ДНК RAG обрабатываются эндонуклеазой Artemis и полимеразами ( e.g., Pol µ), особенно терминальную дезоксинуклеотидилтрансферазу (TdT), что приводит к увеличению разнообразия соединений (выделено серым цветом). Это дополнительное разнообразие генерируется до соединения в двух формах: 1) P-палиндромные последовательности, продуцируемые эндонуклеазным действием Artemis на RAG-индуцированных концах шпилек, и 2) N-нуклеотидные последовательности, добавление нематричных нуклеотидов по TdT. Наконец, к обработанным концам присоединяется лигирующий комплекс, состоящий из лигазы IV, XRCC4 и XLF. Соединение концов ДНК через NHEJ дополнительно участвует в образовании вставок, более того, способствуя разнообразию соединений.NHEJ: негомологичное соединение концов, вставки: вставки или делеции.

    Лимфоциты, как и любые другие типы клеток, обладают несколькими путями репарации ДР, включая HR и NHEJ, которые считаются основными путями репарации ДР ДНК. HR основан на способности клеточного механизма находить и получать доступ к интактной матрице (сестринская хроматида или гомолог хромосомы), используемой для обеспечения безошибочной репарации разрыва. Инициация HR включает идентификацию разорванных концов ДНК, процесс 5′-3′ нуклеолитического расщепления с образованием 3′ одноцепочечной ДНК (оцДНК) (концевая резекция), что позволяет проводить поиск гомологии и синтез ДНК (Elbakry and Löbrich, 2021) .Считается, что NHEJ является быстрым и эффективным способом восстановления DSB, поскольку он включает в себя идентификацию и (квази) прямое лигирование двух концов ДНК без поиска (расширенной) гомологии (рис. 1B) (рассмотрено в (Chang et al., 2017)). Вкратце, при обнаружении DSB гетеродимер Ku70/80 (Ku) загружается на концы ДНК и действует как каркас для рекрутирования дополнительных факторов NHEJ (Gottlieb and Jackson, 1993; Nick McElhinny et al., 2000; Walker et al. ., 2001; Fell and Schild-Poulter, 2015; Ochi et al., 2015). Ku рекрутирует каталитическую субъединицу ДНК-зависимой протеинкиназы (DNA-PKcs) для образования холофермента DNA-PK, который фосфорилирует несколько субстратов, способствуя синапсису концов ДНК и облегчая рекрутирование ферментов процессинга и лигирования концов (Chen X. et al., 2021; Жа и др., 2021). Лигирующий комплекс, состоящий из Ligase IV-XRCC4-XLF, соединяет концы вместе (Ahnesorg et al., 2006; Buck et al., 2006). PAXX, паралог XRCC4 и XLF, также способствует соединению концов во время NHEJ (Ochi et al., 2015; Lescale et al., 2016b), в частности, способствуя накоплению Ku в DSB (Liu et al., 2017). Этот путь репарации, в отличие от HR, иногда определяют как подверженный ошибкам, поскольку он может генерировать небольшие вставки и делеции (вставки) (рис. 1В) (Stinson et al., 2020). Резекция 5′-конца ДНК является основным определяющим фактором для выбора между NHEJ и HR в клетках, как упоминалось выше, HR включает образование обширной 3′-оцДНК. Связанный с хроматином белок 53BP1 вместе с нижестоящими эффекторами противодействует резекции концов ДНК и, таким образом, действует как регулятор pro-NHEJ при повреждении DSB (Mirman and de Lange, 2020).Альтернативное соединение концов (alt-EJ) и одноцепочечный отжиг (SSA) являются еще одними другими путями репарации DSB, основанными на промежуточной длине резекции концов ДНК и склонности к использованию (микро)гомологий (Symington, 2016). Эти пути по своей сути неверны, поскольку они генерируют делеции между участками микрогомологии и поскольку alt-EJ связан с нестабильностью генома, особенно с хромосомными транслокациями (Corneo et al., 2007; Soulas-Sprauel et al., 2007; Yan et al., 2007). . Считается, что Alt-EJ особенно активен в клетках с дефицитом HR или NHEJ (Corneo et al., 2007; Солас-Спрауэль и др., 2007 г.; Ян и др., 2007; Wyatt et al., 2016), хотя некоторые исследования показывают, что этот путь также используется в клетках, способных к репарации ДНК (Lee et al., 2004; Corneo et al., 2007; Coussens et al., 2013; Deriano and Roth, 2013). ).

    Во время рекомбинации V(D)J разнообразие генов рецепторов антигена достигается за счет 1) уникальных комбинаций кодирующих сегментов V, D и J, так называемого комбинаторного разнообразия и 2) неточности реакции репарации DSB в суставах сегментов, обусловленной NHEJ и действие терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазы (TdT), называемое разнообразием соединений (рис. 1B) (Gilfillan et al., 1993; Комори и др., 1993; Рамсден, 2011). Таким образом, NHEJ предлагает идеальный путь восстановления, позволяющий диверсифицировать гены Ig и TCR в ранних лимфоцитах, в отличие от путей восстановления, основанных на резекции и гомологии, которые в конечном итоге восстанавливают последовательности зародышевой линии или вызывают генетическую нестабильность в клетке. В следующих разделах мы рассмотрим различные параметры, которые ограничивают выбор пути репарации DSB до NHEJ во время рекомбинации V(D)J, включая 1) природу концевых структур DSB, 2) установление концевого синапса DSB и 3) препятствие ДНК. концевая резекция и (микро)гомологическая репарация.

    Концевые структуры ДНК, предназначенные для восстановления путем негомологичного соединения концов

    Разорванные концы ДНК часто не могут быть непосредственно присоединены и требуют обработки перед восстановлением, таким образом, природа разорванных концов действует как важный фактор, влияющий на выбор пути восстановления (Чанг и др. , 2017). Во время рекомбинации V(D)J комплекс RAG способствует сборке пресинаптического комплекса, включающего 12 и 23 RSS, до проявления его нуклеазной активности (Schatz and Ji, 2011). Расщепление ДНК происходит в два этапа и зависит от RAG1, RAG2, двухвалентного иона металла и вездесущих факторов изгиба HMGB1 или HMGB2.RAG вводит разрыв между каждым RSS и его фланкирующей кодирующей последовательностью, создавая свободную 3′-ОН группу, которая затем атакует противоположную цепь путем переэтерификации. Эта реакция расщепления приводит к четырем разорванным концам ДНК со специфическими структурами: два запечатанных шпилькой кодирующих конца (CE) в генных сегментах и ​​два тупых сигнальных конца (SE) в RSS (рис. 2А). При расщеплении RAG-индуцированные разрывы ДНК активируют Ataxia telangiectasia mutated (ATM), важный медиатор ответа DSB ДНК (Helmink and Sleckman, 2012).Активированный ATM фосфорилирует многочисленные белки, которые способствуют контрольной точке G1/S и участвуют в защите концов ДНК (см. ниже), благоприятствуя NHEJ. Ku имеет сильное сродство к запечатанным шпилькам, тупым или коротким выступающим концам ДНК (Falzon et al., 1993; Downs and Jackson, 2004), направляя RAG-DSB к репарации NHEJ. Ku не только жадно связывает разорванные концы, но также служит каркасом для рекрутирования DNA-PKcs, формируя холофермент DNA-PK и нижележащие факторы NHEJ, которые обеспечивают процессинг и лигирование RAG-индуцированных концов DSB.Этот второй атрибут Ku особенно важен для CEs, поскольку тупые SE могут быть непосредственно лигированы с помощью XRCC4-лигазы IV с образованием колец ДНК (, т.е. в случае делеционной рекомбинации). Действительно, CE требуют действия эндонуклеазы Artemis, чтобы открыть структуру шпильки (рис. 2А). Надлежащая эндонуклеазная активность Artemis требует DNA-PK и приводит к образованию выступающих 3′-концов с группой -OH (Ma et al., 2002). Эта последняя топология концов ДНК способствует репарации с помощью NHEJ, поскольку XRCC4-лигаза IV требует наличия -OH на обоих концах ДНК для лигирования. Кроме того, комплекс XRCC4-лигаза IV может стимулировать удаление выступов длиной в несколько нуклеотидов, генерируемых Artemis, до лигирования (Gerodimos et al., 2017). Примечательно, что Ku также способствует рекрутированию TdT — третьего лимфоид-специфического белка в дополнение к RAG1 и RAG2 — который добавляет нуклеотиды в открытые Artemis CEs, предшествующие лигированию с помощью XRCC4-Ligase IV. Это связывает NHEJ с созданием разнообразия соединений при кодировании соединений (Gilfillan et al., 1993; Komori et al., 1993; Purugganan et al., 2001; Ramsden, 2011), увеличивая генетическое разнообразие результатов перестройки V(D)J. Следовательно, топология концов DSB, индуцированных RAG, значительно смещает репарацию в сторону NHEJ, создавая среду, предрасположенную к NHEJ.

    РИСУНОК 2 . Основные параметры, ограничивающие выбор пути репарации ДНК NHEJ при рекомбинации V(D)J. (A) Разрыв, вызванный RAG, приводит к образованию ковалентно запечатанного конца шпильки (кодирующий конец) и тупого конца (сигнальный конец). Это облегчает загрузку Ku, который действует как каркас для других факторов NHEJ, поскольку он имеет высокое сродство к тупым или запечатанным концам шпилек.Кроме того, запаянные концы шпилек должны быть открыты другим фактором NHEJ Artemis, что делает концы совместимыми для лигирования. Таким образом, эта топология концов ДНК вносит вклад в создание окружения, склонного к NHEJ. (B) (i) После связывания RSS RAG сканирует соседний хроматин с помощью механизма экструзии петли. Разрыв индуцируется только при достижении совместимого RSS, обеспечивая индукцию DSB в непосредственной близости, несмотря на большой размер локуса иммуноглобулина. (ii) После индукции DSB RAG остается связанной с концами ДНК в пострасщепляющем комплексе (PCC).PCC вместе с NHEJ и ATM-зависимыми связанными с хроматином ДНК-факторами (, например, фосфорилированный h3AX и 53BP1) способствуют связыванию и стабилизации концов ДНК. Это, вероятно, предотвращает поиск отдаленных концов партнерской ДНК и направляет сломанные концы DSB в NHEJ для безопасного восстановления. (C) (i) Рекомбинация V(D)J представляет собой процесс, ограниченный G1, поскольку RAG разлагается при входе в S-фазу. В G1 HR не может работать, поскольку пререпликативные клетки не содержат сестринской хроматиды, используемой в качестве матрицы для репарации.Кроме того, несколько факторов, необходимых для HR, транскрипционно репрессированы в G0/G1. Точно так же Pol θ, важный фактор для alt-EJ, плохо экспрессируется в G1, что ограничивает использование этого пути репарации. Кроме того, alt-EJ блокируется Ku при связывании концов ДНК, что снова способствует процессингу и репарации с помощью NHEJ. (ii) Хроматиновые факторы ответа DSB γh3AX, 53BP1 и, возможно, дополнительные нижестоящие эффекторы способствуют защите концов RAG-DSB, блокируя активность нуклеаз, таких как CtIP, или действуя через репрессоры транскрипции, такие как KAP-1.Эта защита предотвращает резекцию конца ДНК, важный промежуточный этап (микро)направленной репарации (, например, alt-EJ, HR и т. д.), тем самым способствуя NHEJ. NHEJ: негомологичное соединение концов, RSS: сигнальная последовательность рекомбинации, Alt-EJ: альтернативное соединение концов, HR: гомологичная рекомбинация.

    Synapsis — сохранение концов ДНК вместе для безопасного восстановления путем негомологичного соединения концов не требуется для некоторых реакций HR, таких как репликация, индуцированная разрывом (Pham et al., 2021). Синапсис концов DSB во время рекомбинации V(D)J довольно сложен, поскольку он включает секвестрацию четырех концов DSB (

    , т.е. , два CE и два SE). Кроме того, в рекомбинации V(D)J участвуют сегменты генов, которые могут располагаться на значительном расстоянии друг от друга; например, локус тяжелой цепи иммуноглобулина (IgH) зародышевой линии мыши охватывает примерно 2,75 Мпн хромосомы 12 (Lucas et al., 2015). Для эффективной рекомбинации V(D)J 1) генные сегменты V, D и J должны располагаться рядом друг с другом перед расщеплением и 2) концы ДНК, особенно CE, которые требуют процессинга, должны храниться вместе для лигирования.

    Сокращение и пространственная реорганизация локусов антигенных рецепторов во время рекомбинации V(D)J в значительной степени зависят от образования петель хроматина посредством когезин-зависимого процесса экструзии (Bossen et al., 2012; Ebert et al., 2015; Ba et al. ., 2020; Hill et al., 2020; Dai et al., 2021; Davidson, Peters, 2021), а также транскрипцию и субнуклеарную релокацию (Rogers et al., 2021). Примечательно, что этот механизм уравновешивает локусы для рекомбинации независимо от RAG, но также наделяет связанную с RSS RAG способностью сканировать хроматин в поисках RSS-партнера, обеспечивая направленность и пространственное ограничение активности RAG в домене петли хроматина (рис. 2Bi) (Lin и другие., 2018; Чжан и др., 2019 г.; Ба и др., 2020; Хилл и др., 2020 г.; Дай и др., 2021). Дополнительные связанные с хроматином факторы, такие как 53BP1, способствуют сближению сегментов V(D)J, т.к. истощение этого последнего фактора приводит к редукции дистальных соединений V и DJ сегментов (Difilippantonio et al. , 2008). Индукция двух DSB рядом друг с другом, вероятно, способствует быстрой репарации RAG-индуцированных разрывов ДНК с помощью NHEJ без необходимости поиска партнерских концов ДНК.

    После расщепления белки RAG остаются связанными с концами ДНК в пострасщепляющем комплексе (PCC) (рис. 2Bii).Было показано, что мутации, приводящие к дестабилизации RAG-PCC, увеличивают репарацию RAG-опосредованных DSB через HR и alt-EJ (Lee et al., 2004; Corneo et al., 2007; Coussens et al., 2013; Deriano and Roth, 2013). ), пути, считающиеся нетрадиционными для рекомбинации V(D)J. Эти наблюдения показали, что RAG-PCC может способствовать передаче концов ДНК механизму NHEJ для восстановления, тем самым защищая их от подверженных ошибкам путей соединения концов и аберрантных событий рекомбинации (Roth, 2003; Lee et al., 2004; Дериано и Рот, 2013). Действительно, мутант RAG2, обладающий делецией C-концевых остатков 352–527 (ядерный RAG2), дестабилизирует RAG-PCC и связан с повышенной частотой аберрантных результатов рекомбинации in vitro и с межхромосомными транслокациями с участием V (D)J локус in vivo (Sekiguchi et al. , 2001; Talukder et al., 2004; Corneo et al., 2007; Curry and Schlissel, 2008; Deriano et al., 2011; Coussens et al., 2013). ). Кроме того, у мышей с дефицитом core RAG2/p53 наблюдается повышенная нестабильность генома и ускоренный лимфомагенез посредством alt-EJ, что приводит к образованию опухолей, несущих сложный ландшафт хромосомных перестроек (Deriano et al., 2011; Миюшкович и др., 2012; Миюшкович и др., 2015). Поразительно, лимфомы и транслокации, наблюдаемые у последних животных, напоминают таковые у ATM-дефицитных мышей, указывая на то, что сходный механизм дестабилизации концов ДНК может лежать в основе геномной нестабильности и лимфомагенеза в обеих мышиных моделях (Deriano et al., 2011). В соответствии с этим, ATM — помимо его роли в активации контрольных точек — важен для стабильности RAG-PCCs in vivo (Bredemeyer et al., 2006). При повреждении DSB ATM фосфорилирует связанные с хроматином и ДНК белки, в том числе вариант гистонов h3AX (с образованием γh3AX), 53BP1, MDC1 и факторы комплекса MRN (MRE11, RAD50 и NBS1), которые собираются по обе стороны от разрывов ДНК, образуя так называемые очаги репарации ядерной ДНК. Стабилизирующая функция АТМ зависит от его киназной активности. Т.о., предполагается, что образование ATM-зависимых очагов репарации ДНК связывает концы ДНК для правильного соединения через NHEJ (Fig. 2Bii). В ATM-дефицитных клетках, подвергающихся рекомбинации V(D)J, часть КЭ, избегающих PCC, иногда аберрантно соединяются, образуя хромосомные делеции, инверсии и транслокации (Bredemeyer et al., 2006; Helmink and Sleckman, 2012). В целом, эти результаты показывают, что RAG2 (расширение RAG-PCC) и ATM имеют общие механистические свойства во время рекомбинации V(D)J, благодаря стабилизации разорванных концов ДНК, что предотвращает использование альтернативных путей репарации.

    Дополнительные сведения о механизмах, ответственных за стабилизацию расщепленных RAG концов ДНК, получены в результате анализа моделей животных с двойным дефицитом XLF и ATM или корового RAG2. XLF и XRCC4 являются двумя отдаленно родственными членами одного и того же белкового семейства и имеют структурное сходство (Callebaut et al. , 2006; Andres et al., 2007; Li Y. et al., 2008). Вместе они образуют длинные филаменты, которые, как считается, помогают разрывать связи ДНК и синапсы во время восстановления (рис. 2Bii) (Tsai et al., 2007; Riballo et al., 2009; Хаммель и др., 2011; Ропарс и др., 2011; Рид и др., 2015; Чен С. и др., 2021). В отличие от других мышей с дефицитом NHEJ, мыши с дефицитом XLF не являются заметно иммунодефицитными, и ранние лимфоидные клетки этих животных выполняют почти нормальную рекомбинацию V(D)J. Эти наблюдения предполагают, что другие факторы или пути компенсируют функцию XLF во время рекомбинации V(D)J (Li G. et al., 2008). Фактически, клетки, дефицитные как по XLF, так и по ATM-зависимому ответу DSB (, например, XLF и ATM, 53BP1 или двойные мутанты h3AX), демонстрируют серьезный блок в развитии лимфоцитов и значительный дефект в репарации RAG-опосредованных DSB.Это выявляет функциональную избыточность между факторами ответа XLF и ATM-DSB во время рекомбинации V(D)J (Li G. et al. , 2008; Zha et al., 2011; Liu et al., 2012; Oksenych et al., 2012; Оксеныч и др., 2013; Вера и др., 2013; Кумар и др., 2014). Сходным образом, двойной дефицит core RAG2/XLF приводит к глубокой лимфопении, связанной с тяжелым дефектом соединения расщепленных RAG концов ДНК (Lescale et al., 2016a). Эти результаты согласуются с двухуровневой моделью, в которой белки RAG вместе с ответом DSB хроматина ATM взаимодействуют с факторами NHEJ, чтобы способствовать функциональной рекомбинации V(D)J и подчеркивают важность связывания концов ДНК для правильной репарации.

    Блокирование резекции концов ДНК и (микро)гомологической репарации двухцепочечных разрывов

    A G1-Phase Business

    RAG-индуцированная V(D)J-рекомбинация ограничивается фазой G1 клеточного цикла, которая обеспечивает дополнительный уровень ограничений на ремонт, управляемый NHEJ. Это связано со специфическим разрушением RAG2 во время перехода G1-to-S, которое запускается фосфорилированием остатка T490 (Li et al. , 1996). Кроме того, RAG-индуцированные DSB запускают ATM/p53-зависимый DSB-ответ, который способствует остановке клеточного цикла G1/S и, в конечном итоге, гибели клеток (рис. 2Ci).Наконец, RAG-DSB активируют специфическую контрольную точку, которая противостоит пролиферативным сигналам рецепторов пре-В-клеток и предотвращает переход клеток в S-фазу до устранения повреждения (Bredemeyer et al., 2008; Bednarski and Sleckman, 2012; Bednarski et al., 2016).

    Поскольку идеальной матрицей для HR является сестринская хроматида, HR ограничивается фазами S и G2 клеточного цикла и не может полностью функционировать в клетках фазы G1. Alt-EJ (и SSA) не обладают этим ограничением, поэтому потенциально могут служить альтернативой NHEJ для репарации DSB в неделящихся клетках.Используя методы высокопроизводительного секвенирования, недавно было показано, что соединение концов RAG-индуцированных DSB практически отсутствует в G0/G1-задержанных прогениторных (про-) В-клетках, дефицитных по XRCC4 (Yu et al. , 2020). В тех же условиях Cas9-индуцированные DSB также плохо восстанавливаются, что указывает на то, что дополнительные факторы, отличные от RAG, ограничивают доступ разорванных концов ДНК к путям alt-EJ в клетках G0/G1-фазы. Точно так же DSB, генерируемые эндонуклеазами RAG, Cas9 или цинковыми пальцами, в pro-B клетках с арестом G0/G1 остаются несвязанными в отсутствие лигазы IV (Liang et al., 2021). Однако клетки pro-B с дефицитом Ku70 или с дефицитом Ku70/лигазы IV G0/G1 выполняют довольно надежное соединение концов, хотя и на более низких уровнях, чем клетки дикого типа, что указывает на то, что Ku действует как сильный репрессор alt-EJ в Клетки фазы G0/G1 (рис. 2Ci) (Frock et al., 2021; Liang et al., 2021). Клетки также могут быть не полностью приспособлены для выполнения зависимой от резекции и гомологии репарации в G0/G1. Например, LIN37, компонент репрессора транскрипции DREAM, ингибирует резекцию и HR в про-В-клетках с блокировкой G0/G1 путем подавления экспрессии белков HR, таких как BRCA1, BRCA2, PALB2 и RAD51 (Chen B. Р. и др., 2021). Точно так же ДНК-полимераза тета (Pol θ, кодируемая Polq у мышей), вовлеченная в alt-EJ (Ramsden et al., 2021), не экспрессируется в про-В-клетках с остановкой G0/G1 (рис. 2Ci) ( Ю и др., 2020).

    Тем не менее, анализ мышей с комбинированным дефицитом p53 и NHEJ (, т.е. Ku, XRCC4 или Ligase IV) необратимо развивает агрессивные про-В-лимфомы с RAG-зависимыми транслокациями и амплификациями между Igh и c-Myc , автор alt-EJ (Nussenzweig and Nussenzweig, 2010; Gostissa et al., 2011; Ramsden and Nussenzweig, 2021). Было высказано предположение, что дефицит p53 позволяет клеткам неадекватно переходить в S-фазу и приобретать DSB, которые инициируют хромосомные транслокации и амплификации (Paulson et al., 1998; Zhu et al., 2002). Фактически, исследование in vitro с использованием XRCC4/p53-дефицитных клеточных линий pro-B показывает, что переход от G0/G1-фазы к S-G2/M-фазам клеточного цикла делает возможной репарацию alt-EJ, способствуя массивной репарации. генетическая нестабильность в виде хромосомных делеций и транслокаций (Yu et al., 2020). Заманчиво предположить, что нерепарированные разрывы G1-ДНК, прогрессирующие до S-G2/M, теряются в клеточном пространстве, а незащищенные концы ДНК подвергаются повторяющимся атакам нуклеаз до тех пор, пока (микро)управляемый гомологией alt-EJ не стабилизирует их в цис или транс . В связи с этим, хотя теоретически эти потерянные концы ДНК могут обрабатываться несколькими подпутями, направленными на гомологию (Elbakry and Löbrich, 2021), репарация G0/G1-DSB в S-G2/M будет строго зависеть от Pol θ .Действительно, в про-В-клетках с тройным дефицитом XRCC4/Pol θ/p53 DSB, индуцированные в G1, накапливаются в виде хромосомных разрывов, что приводит к летальности при следующем митозе (Yu et al., 2020). Способствует ли Pol θ развитию про-В-клеточных лимфом, несущих транслокации Igh/c-Myc , у животных с дефицитом NHEJ/p53, еще предстоит выяснить.

    Защита концов ДНК

    Степень резекции активно регулируется защитой концов ДНК, что ограничивает доступ нуклеаз к участкам разрыва. В дополнение к вышеупомянутым параметрам (, т.е. концевых структур ДНК и синапсов), несколько связанных с хроматином факторов ответа DSB локализуются в RAG-DSB и, как считается, защищают концы ДНК от резекции, включая γh3AX и 53BP1 (Difilippantonio et al. ., 2008; Helmink et al., 2011; Zha et al., 2011; Dorsett et al., 2014; Lescale et al., 2016a; Chen BR et al., 2021). В G1 yh3AX предотвращает опосредованную CtIP нуклеолитическую резекцию (Helmink et al., 2011). Точно так же было показано, что KAP-1, репрессор транскрипции, модулирующий структуру хроматина, способствует резекции лимфоцитов G1 в отсутствие yh3AX и 53BP1 (Tubbs et al., 2014). Более того, истощение запасов 53BP1 в про-В-клетках G0/G1, заблокированных с дефицитом лигазы IV, приводит к повышенному уровню резекции на концах DSB, индуцированных облучением, демонстрируя, что 53BP1 имеет решающее значение для защиты концов ДНК в этой фазе клеточного цикла (рис. 2Cii). ) (Чен Б.Р. и др., 2021). Комплекс Shieldin, состоящий из SHLD1, SHLD2, SHLD3 и MAD2L2/REV7, действует ниже 53BP1-RIF1, противодействуя резекции концов ДНК и отдавая предпочтение NHEJ, а не HR (Greenberg, 2018; Setiaputra and Durocher, 2019; Mirman and de Lange, 2020; де Крийгер и др. , 2021). Он действует парадоксальным образом, поскольку ему необходимо связать концы одноцепочечной ДНК длиной более 50 нуклеотидов, чтобы воспрепятствовать резекции концов ДНК (Dev et al., 2018; Findlay et al., 2018; Gao et al., 2018; Noordermeer et al. ., 2018). Механически считается, что он напрямую ингибирует резекцию, физически блокируя доступ нуклеаз к свободным концам оцДНК-дцДНК. Кроме того, этот комплекс способствует привлечению и координации дополнительных факторов, ведущих к процессингу промежуточных соединений оцДНК-дцДНК до восстановления NHEJ, таких как ASTE1, который расщепляет выступающую оцДНК, и CST (CTC1-STN1-TEN1)-ДНК-полимераза-α. -комплекс праймазы для восполнения остаточной одноцепочечной ДНК (Mirman et al., 2018; Чжао и др., 2021). Хотя комплекс Shieldin противодействует HR в BRCA1-дефицитных клетках и важен для репарации, управляемой NHEJ, во время рекомбинации переключения класса или слияния незащищенных теломер, он кажется необязательным для рекомбинации V(D)J (Dev et al. , 2018; Ghezraoui). и др., 2018; Мирман и др., 2018; Линг и др., 2020). Действительно, дефицит SHLD2 или REV7 у мышей существенно не изменяет развитие лимфоцитов и рекомбинацию V(D)J (Ghezraoui et al., 2018; Ling et al., 2020).Следует отметить, что в клетках дикого типа процессинг RAG-индуцированных концов ДНК не приводит к образованию промежуточных звеньев одноцепочечной ДНК длиной более 50 нуклеотидов, что потенциально объясняет, почему защита, опосредованная шилдином до присоединения, представляется необязательным во время рекомбинации V(D)J. . Тем не менее, еще предстоит исследовать, играет ли комплекс Shieldin роль в защите концов ДНК, генерируемых RAG, от резекции в контексте поврежденного NHEJ. У мышей с дефицитом XLF (нарушение NHEJ) 53BP1 играет важную роль в противодействии резекции концов RAG-DSB, способствуя рекомбинации V(D)J и дифференцировке лимфоцитов (Liu et al., 2012; Оксеныч и др., 2012). Тем не менее, неясно, опосредована ли эта защита концов ДНК нижестоящими эффекторами 53BP1 (, например, , комплекс Shieldin) или внутренними свойствами 53BP1 (рис. 2Cii). Примечательно, что Ku также противодействует резекции концов ДНК с помощью как минимум двух различных механизмов: 1) путем блокирования доступа нуклеаз к концам DSB (Zahid et al., 2021) и 2) путем рекрутирования TdT, который способствует независимому от матрицы и зависимому от матрицы синтезу до лигирование (Loc’h and Delarue, 2018).Взятые вместе, в контексте рекомбинации V(D)J, подавление механизма резекции концов DSB и защита концов ДНК факторами, связанными с хроматином, и Ku, по-видимому, действуют как передние барьеры против резекции, способствуя репарации через NHEJ, но не HR или alt-EJ (рис. 2C).

    Заключение и перспективы

    В этом обзоре мы представляем рекомбинацию V(D)J как важную биологическую установку для исследования факторов, влияющих на выбор пути репарации DSB, особенно тех, которые ограничивают репарацию DSB до NHEJ.Этот путь репарации необходим для комбинаторной перестройки V(D)J, а также для генерации разнообразия в соединениях V(D)J, двух предпосылок для диверсификации генов антигенных рецепторов и установления первичного иммунного репертуара. Во время рекомбинации V(D)J несколько факторов инициируют репарацию посредством NHEJ, включая пространственную организацию геномных локусов, подвергающихся этим событиям перестройки. Кроме того, нуклеаза RAG, тип генерируемых DSB, среда, специфичная для фазы G1, и специальный ответ DSB предрасполагают (возможно, диктуют) восстановление через NHEJ.Несмотря на многочисленные исследования, которые проливают свет на механизмы, с помощью которых DSB, генерируемые во время рекомбинации V(D)J, смещаются в сторону репарации с помощью NHEJ, несколько вопросов остаются без ответа. Например, в то время как RAG-PCC играет роль в содействии репарации через NHEJ, возможно, путем стабилизации концов ДНК, остается неясным, взаимодействуют ли белки RAG непосредственно с определенными факторами NHEJ и будут ли такие взаимодействия способствовать выбору пути NHEJ. Мы также обсудили важность блокирования резекции концов ДНК во время рекомбинации V(D)J за счет действия специфических факторов ответа DSB хроматина, особенно 53BP1. Неясно, зависит ли эта защита концов только от способности факторов, связанных с хроматином, поддерживать стабильный PCC, или она также требует специфических нижестоящих эффекторов для действия на концах DSB. В связи с этим интересно отметить, что механизм действия комплекса Shieldin на концах DSB, генерируемых AID во время рекомбинации переключения класса IgH, несколько напоминает действие Ku во время рекомбинации V(D)J. И Ku, и комплекс Шилдина способны физически препятствовать резекции концов DSB и активно рекрутировать факторы, участвующие в модификациях концов ДНК (, i.e., действие Ku и TdT/Artemis на комплекс Shieldin и ASTE1/CST-ДНК-полимеразу α). В Ku-дефицитных G0/G1-задержанных pro-B клетках (и в гораздо меньшей степени в клетках с дефицитом XRCC4 или лигазы IV) суставы V(D)J имеют довольно короткие следы резекции (обычно менее 100 нуклеотидов) ( Ю и др., 2020; Лян и др., 2021). Могут ли концы RAG-DSB получить пользу от комплексной защиты Shieldin от резекции в таких обстоятельствах? Кроме того, природа alt-EJ и факторы, вовлеченные в alt-EJ в клетках G0/G1-фазы, в отличие от Pol θ-опосредованного alt-EJ в S-G2/M, еще предстоит установить. Роль этих подпутей в возникновении про-В-клеточных лимфом у животных с дефицитом NHEJ/p53 также еще предстоит изучить. Наконец, локусы антигенных рецепторов перемещаются с периферии ядра в пермиссивный эухроматин внутри ядра перед рекомбинацией V(D)J (Rogers et al., 2021). Это субнуклеарное перемещение, вероятно, обеспечивает специфическое локальное окружение хроматина, которое может влиять на нижестоящие события репарации DSB (Mitrensi et al., 2020). Недавние исследования также подчеркнули важность (ре)организации и динамики трехмерного генома в репарации DSB, например, путем установления очагов ответа на DSB γh3AX/53BP1 (Arnould et al., 2021) или ограничение поиска гомологии во время HR (Piazza et al., 2021), два важных события хроматина, влияющие на исход репарации DSB и выбор пути. Как такая динамика хромосом способствует (отсутствию) выбора пути DSB ДНК и поддержанию общей целостности генома во время рекомбинации V(D)J, остается вопросом для будущих исследований.

    Вклад авторов

    AL, TM и LD написали рукопись и одобрили представленную версию.

    Финансирование

    Лаборатория Deriano финансируется Институтом Пастера, Национальным институтом здоровья и медицинских исследований (INSERM), Worldwide Cancer Research (грант № 19–0333), Ligue Nationale Contre le Cancer (Equipe labellis ée 2019) и Национальный институт рака (INCa, грант № PLBIO19-122).AL получил финансирование от Université de Paris, Sorbonne Paris Cité.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось в отсутствие каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Примечания издателя

    Все претензии, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций или издателя, редакторов и рецензентов.Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

    Ссылки

    Анесорг, П. , Смит, П., и Джексон, С.П. (2006). XLF взаимодействует с комплексом XRCC4-ДНК-лигаза IV, способствуя негомологичному соединению концов ДНК. сотовый 124, 301–313. doi:10.1016/j.cell.2005.12.031

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Андрес С. Н., Модести М., Цай К.Дж., Чу, Г. и Юноп, М.С. (2007). Кристаллическая структура человеческого XLF: поворот в негомологичном соединении концов ДНК. Мол. Чел 28, 1093–1101. doi:10.1016/j.molcel.2007.10.024

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Арноулд К., Роше В., Фину А.-Л., Клуэр Т., Ли К., Чжоу Ф. и др. (2021). Выдавливание петель как механизм формирования очагов репарации повреждений ДНК. Природа 590, 660–665. doi:10.1038/s41586-021-03193-z

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Ба, З., Lou, J., Ye, A.Y., Dai, H.-Q., Dring, E.W., Lin, S.G., et al. (2020). CTCF организует управляемое когезином V(D)J рекомбинационное сканирование дальнего действия. Природа 586, 305–310. doi:10.1038/s41586-020-2578-0

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Беднарски Дж. Дж., Пандей Р., Шульте Э., Уайт Л. С., Чен Б.-Р., Сандовал Г. Дж. и др. (2016). RAG-опосредованные двухцепочечные разрывы ДНК активируют контрольную точку, специфичную для типа клеток, для ингибирования сигналов рецепторов пре-В-клеток. Дж. Экспл. Мед. 213, 209–223. doi:10.1084/jem.20151048

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Беднарски, Дж. Дж., и Слекман, Б. П. (2012). Развитие лимфоцитов: интеграция сигнализации о повреждении ДНК. Доп. Иммунол. 116, 175–204. doi:10.1016/B978-0-12-394300-2.00006-5

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Боссен, К., Манссон, Р., и Мюрре, К. (2012). Топология хроматина и регуляция сборки антигенных рецепторов. год. Преподобный Иммунол. 30, 337–356. doi:10.1146/annurev-immunol-020711-075003

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Бредемейер А. Л., Хельминк Б. А., Иннес К. Л., Кальдерон Б., МакГиннис Л. М., Маховальд Г. К. и др. (2008). Двойные разрывы ДНК активируют многофункциональную генетическую программу развития лимфоцитов. Природа 456, 819–823. doi:10.1038/nature07392

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Бредемейер, А.L., Sharma, G.G., Huang, C.-Y., Helmink, B.A., Walker, L.M., Khor, K.C., et al. (2006). АТМ стабилизирует комплексы с двухцепочечным разрывом ДНК во время рекомбинации V(D)J. Природа 442, 466–470. doi:10.1038/nature04866

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Бак Д., Маливер Л., де Шассеваль Р., Барро А., Фонданеш М.-К., Санал О. и др. (2006). Cernunnos, новый негомологичный фактор соединения концов, мутирует при иммунодефиците человека с микроцефалией. сотовый 124, 287–299. doi:10.1016/j.cell.2005.12.030

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Каллебаут И. , Маливер Л., Фишер А., Морнон Ж.-П., Реви П. и де Вильяртай Ж.-П. (2006). Cernunnos взаимодействует с комплексом XRCC4·ДНК-лигаза IV и гомологичен дрожжевому негомологичному фактору соединения концов Nej1. J. Biol. хим. 281, 13857–13860. doi:10.1074/jbc.C500473200

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Чанг, Х.Х.Ю., Паннунцио, Н.Р., Адачи, Н., и Либер, М.Р. (2017). Негомологичное соединение концов ДНК и альтернативные пути восстановления двухцепочечных разрывов. Нац. Преподобный Мол. Цель биол. 18, 495–506. doi:10.1038/nrm.2017.48

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Чен Б.-Р., Ван Ю., Таббс А., Зонг Д., Фаулер Ф. К., Золнерович Н. и др. (2021). LIN37-DREAM предотвращает резекцию концов ДНК и гомологичную рекомбинацию при двухцепочечных разрывах ДНК в покоящихся клетках. Элиф 10, е68466.doi:10.7554/eLife.68466

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Чен С., Ли Л., Найла Т. , Фишбейн С., Ван А., Томкинсон А. Э. и др. (2021). Структурная основа синаптического перехода от дальнего к ближнему в NHEJ. Природа 593, 294–298. doi:10.1038/s41586-021-03458-7

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Chen X., Xu X., Chen Y., Cheung J.C., Wang H., Jiang J. и др. (2021). Структура активированной ДНК-ПК и ее значение для NHEJ. Мол. Чел . 81, 801–810.e3. doi:10.1016/j.molcel.2020.12.015

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    Ciccia, A., and Elledge, SJ (2010). Реакция на повреждение ДНК: сделать игру с ножами безопасной. Мол. Сел 40, 179–204. doi:10.1016/j.molcel.2010.09.019

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Корнео Б., Вендланд Р. Л., Дериано Л., Цуй X., Кляйн И. А., Вонг С.-Ю. и др. (2007). Мутации Rag раскрывают надежное альтернативное соединение концов. Природа 449, 483–486. doi:10.1038/nature06168

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Куссенс, М. А., Вендланд, Р. Л., Дериано, Л., Линдси, Ч. Р., Арнал, С. М., и Рот, Д. Б. (2013). Кислотный шарнир RAG2 ограничивает выбор пути восстановления и способствует стабильности генома. Cel Rep. 4, 870–878. doi:10.1016/j.celrep.2013.07.041

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Карри, Дж. Д., и Шлиссель, М. С. (2008). Неосновной домен RAG2 способствует упорядоченной регуляции рекомбинации V(D)J. Рез. нуклеиновых кислот. 36, 5750–5762. doi:10.1093/nar/gkn553

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Dai, H.-Q., Hu, H., Lou, J., Ye, A.Y., Ba, Z., Zhang, X., et al. (2021). Выдавливание петли опосредует физиологическое сокращение локуса Igh для сканирования RAG. Природа 590, 338–343. doi:10.1038/s41586-020-03121-7

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Дэвидсон И. Ф. и Питерс Дж.-М. (2021). Складывание генома посредством экструзии петель комплексами SMC. Нац. Преподобный Мол. Цель биол. 22, 445–464. doi:10.1038/s41580-021-00349-7

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    де Крийгер И., Бурсма В. и Джейкобс Дж. Дж. Л. (2021). REV7: Мастер на все руки. Тенденции Cel Biol. 31, 686–701. doi:10.1016/j.tcb.2021.04.002

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Дериано Л., Шомейл Дж., Куссенс М., Мултани А., Чоу Ю., Алексеенко А.В. и др. (2011). C-конец RAG2 подавляет геномную нестабильность и лимфомагенез. Природа 471, 119–123. doi:10.1038/nature09755

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Дериано Л. и Рот Д. Б. (2013). Модернизация репертуара негомологичных соединений концов: альтернативный и классический NHEJ делят сцену. год. Преподобный Жене. 47, 433–455. doi:10.1146/annurev-genet-110711-155540

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Дев, Х., Чанг, Т.-В. В., Лескаль К., де Крийгер И., Мартин А. Г., Пилгер Д. и др. (2018). Комплекс Shieldin способствует соединению концов ДНК и противодействует гомологичной рекомбинации в BRCA1-нулевых клетках. Нац. Цель биол. 20, 954–965. doi:10.1038/s41556-018-0140-1

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Difilippantonio, S., Gapud, E., Wong, N., Huang, C.-Y., Mahowald, G., Chen, H. T., et al. (2008). 53BP1 способствует дальнему соединению концов ДНК во время рекомбинации V(D)J. Природа 456, 529–533. doi:10.1038/nature07476

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Дорсетт Ю., Zhou, Y., Tubbs, A.T., Chen, B.-R., Purman, C., Lee, B.-S., et al. (2014). HCoDES выявляет концевые структуры хромосомной ДНК с однонуклеотидным разрешением. Мол. Чел . 56, 808–818. doi:10.1016/j.molcel.2014.10.024

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Даунс, Дж. А., и Джексон, С. П. (2004). Средство для достижения конца ДНК: множество ролей Ку. Нац. Преподобный Мол. Цель биол. 5, 367–378. doi:10.1038/nrm1367

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Фальзон, М., Fewell, J.W., and Kuff, E.L. (1993). EBP-80, фактор транскрипции, очень похожий на человеческий аутоантиген Ku, распознает переходы от одной цепи к двойной в ДНК. J. Biol. хим. 268, 10546–10552. doi:10.1016/s0021-9258(18)82233-5

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    Финдли С., Хит Дж., Луо В. М., Малина А., Морин Т., Куломб Ю. и др. (2018). SHLD 2/FAM 35A сотрудничает с REV 7 для координации выбора пути восстановления двухцепочечных разрывов ДНК. EMBO J. 37, e100158. doi:10.15252/embj.2018100158

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Гао С., Фэн С., Нин С., Лю Дж., Чжао Х., Сюй Ю. и др. (2018). Комплекс OB-Fold контролирует пути восстановления двухцепочечных разрывов ДНК. Нац. коммун. 9, 3925. doi:10.1038/s41467-018-06407-7

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Gerodimos, C. A., Chang, H.H.Y., Watanabe, G. и Lieber, M.Р. (2017). Влияние конфигурации концов ДНК на XRCC4-ДНК-лигазу IV и ее стимуляцию активности Artemis. J. Biol. хим. 292, 13914–13924. doi:10.1074/jbc.M117.798850

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Ghezraoui, H., Oliveira, C., Becker, J.R., Bilham, K., Moralli, D., Anzilotti, C., et al. (2018). 53BP1 Сотрудничество с комплексом REV7-Shieldin лежит в основе специфичного для структуры ДНК NHEJ. Природа 560, 122–127. дои: 10.6019/PXD00965010.1038/s41586-018-0362-1

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Гилфиллан С., Дирих А., Лемер М., Бенуа К. и Матис Д. (1993). Мыши, лишенные TdT: зрелые животные с незрелым репертуаром лимфоцитов. Наука 261, 1175–1178. doi:10.1126/science.8356452

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Гольдштейн М. и Кастан М. Б. (2015). Реакция на повреждение ДНК: последствия для реакции опухоли на облучение и химиотерапию. год. преподобный мед. 66, 129–143. doi:10.1146/annurev-med-081313-121208

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Гостисса М., Альт Ф. В. и Чиарле Р. (2011). Механизмы, стимулирующие и подавляющие хромосомные транслокации в лимфоцитах. год. Преподобный Иммунол. 29, 319–350. doi:10.1146/annurev-immunol-031210-101329

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Готтлиб, Т. М., и Джексон, С. П. (1993).ДНК-зависимая протеинкиназа: потребность в концах ДНК и ассоциация с Ku-антигеном. Моб. 72, 131–142. doi:10.1016/0092-8674(93)-w

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Hammel, M., Rey, M., Yu, Y., Mani, R.S., Classen, S., Liu, M., et al. (2011). Взаимодействие белка XRCC4 с XRCC4-подобным фактором (XLF) Создание удлиненного каркаса с канавками для лигирования ДНК и восстановления разрывов двойных цепей. J. Biol. хим. 286, 32638–32650. doi:10.1074/jbc.M111.272641

    CrossRef Полный текст | Google Scholar

    Хельминк, Б. А., и Слекман, Б. П. (2012). Реакция на RAG-опосредованные двухцепочечные разрывы ДНК и их репарация. год. Преподобный Иммунол. 30, 175–202. doi:10.1146/annurev-immunol-030409-101320

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Хельминк Б. А., Таббс А. Т., Дорсетт Ю., Беднарски Дж. Дж., Уокер Л. М., Фенг З. и др. (2011). h3AX предотвращает CtIP-опосредованную резекцию концов ДНК и аберрантную репарацию в лимфоцитах G1-фазы. Природа 469, 245–249. doi:10.1038/nature09585

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Hill, L., Ebert, A., Jaritz, M., Wutz, G., Nagasaka, K., Tagoh, H., et al. (2020). Репрессия Wapl с помощью Pax5 способствует рекомбинации гена V путем экструзии петли Igh. Природа 584, 142–147. doi:10.1038/s41586-020-2454-y

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Комори Т. , Окада А., Стюарт В. и Альт Ф. В. (1993).Отсутствие N-областей в генах вариабельной области антигенных рецепторов TdT-дефицитных лимфоцитов. Наука 261, 1171–1175. doi:10.1126/science.8356451

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Кумар В., Альт Ф. В. и Оксеныч В. (2014). Функциональные совпадения между XLF и ATM-зависимой реакцией на разрыв двойной цепи ДНК. Восстановление ДНК 16, 11–22. doi:10.1016/j.dnarep.2014.01.010

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Ли, Г.С., Нейдич, М.Б., Салус, С.С., и Рот, Д.Б. (2004). Белки RAG направляют двухцепочечные разрывы на определенный путь, подавляя склонную к ошибкам репарацию, но RAG Nicking инициирует гомологичную рекомбинацию. сотовый 117, 171–184. doi:10.1016/s0092-8674(04)00301-0

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лескаль К., Абрамовски В., Бедора-Фор М., Муринье В., Вера Г. , Рот Д. Б. и др. (2016а). Взаимодействие RAG2 и XLF/Cernunnos раскрывает новую роль комплекса RAG в репарации ДНК. Нац. коммун. 7, 10529. doi:10.1038/ncomms10529

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лескаль, К., и Дериано, Л. (2016). Рекомбинация V(D)J: организация разнообразия без ущерба. Энциклопедия клеточной биологии 3, 550–566.

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Google Scholar

    Лескаль К., Ленден Хассе Х., Блэкфорд А. Н., Бальмус Г., Бьянки Дж. Дж., Ю В. и др. (2016б). Конкретные роли паралогов XRCC4 PAXX и XLF во время рекомбинации V(D)J. Cel Rep. 16, 2967–2979. doi:10.1016/j.celrep.2016.08.069

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Li, G., Alt, F.W., Cheng, H.-L., Brush, J.W., Goff, P.H., Murphy, M.M., et al. (2008). Лимфоцит-специфическая компенсация функций соединения концов XLF/cernunnos в рекомбинации V(D)J. Мол. Чел . 31, 631–640. doi:10.1016/j.molcel.2008.07.017

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Ли Ю., Чиргадзе Д.Y., Bolanos-Garcia, V.M., Sibanda, B.L., Davies, O.R., Ahnesorg, P., et al. (2008). Кристаллическая структура XLF/Cernunnos человека обнаруживает неожиданные отличия от XRCC4 с последствиями для NHEJ. EMBO J. 27, 290–300. doi:10.1038/sj.emboj.7601942

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Ли, З., Дордаи, Д. И., Ли, Дж., и Дезидерио, С. (1996). Консервативный сигнал деградации регулирует накопление RAG-2 во время клеточного деления и связывает рекомбинацию V(D)J с клеточным циклом. Иммунитет 5, 575–589. doi:10.1016/S1074-7613(00)80272-1

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лян З., Кумар В., Ле Бутейлер М., Зурита Дж., Кенрик Дж., Лин С. Г. и др. (2021). Ku70 подавляет альтернативное соединение концов в В-клетках-предшественниках с арестом G1. Проц. Натл. акад. науч. США . 118, е2103630118. doi:10.1073/pnas.2103630118

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лин, С. Г., Ба, З., Альт, Ф.В., и Чжан, Ю. (2018). Сканирование хроматина RAG во время рекомбинации V(D)J и экструзии петли хроматина являются связанными процессами. Доп. Иммунол. 139, 93–135. doi:10.1016/bs.ai.2018.07.001

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Линг А.К., Манро М., Чаудхари Н., Ли К., Берру М., Ву Б. и др. (2020). SHLD 2 способствует рекомбинации переключения классов, предотвращая инактивирующие делеции в локусе Igh. EMBO Реп. 21, e49823.doi:10.15252/embr.201949823

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лю X., Цзян В., Дюбуа Р. Л., Ямамото К., Вольнер З. и Чжа С. (2012). Перекрывающиеся функции между белком репарации XLF и фактором реакции на повреждение ДНК 53BP1 в соединении концов и развитии лимфоцитов. Проц. Натл. акад. науч. 109, 3903–3908. doi:10.1073/pnas.1120160109

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лю X., Шао Z., Цзян В., Ли, Б.Дж., и Жа, С. (2017). PAXX способствует накоплению KU при разрывах ДНК и необходим для соединения концов у мышей с дефицитом XLF. Нац. коммун. 8, 13816. doi:10.1038/ncomms13816

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лок, Дж., и Деларю, М. (2018). Терминальная дезоксинуклеотидилтрансфераза: история ДНК-полимеразы без шаблона, способной к связыванию ДНК и шаблонному синтезу между цепями. Курс. мнение Структура биол. 53, 22–31.doi:10.1016/j.sbi.2018.03.019

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Лукас Дж. С., Мурре К., Фини А. Дж. и Риблет Р. (2015). Структура и регуляция локусов иммуноглобулинов. Мол. биол. B Cell (Второе издание) 2015, 1–11. doi:10.1016/B978-0-12-397933-9. 00001-1

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Ма, Ю., Паннике, У., Шварц, К., и Либер, М. Р. (2002). Открытие шпильки и процессинг выступающих частей комплексом Artemis/ДНК-зависимой протеинкиназы при негомологичном соединении концов и рекомбинации V(D)J. сотовый 108, 781–794. doi:10.1016/S0092-8674(02)00671-2

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Миюшкович М., Браун С. М., Танг З., Линдси С. Р., Эфстатиадис Э., Дериано Л. и др. (2012). Упрощенный метод обнаружения структурных вариантов в геномах рака с помощью секвенирования парных концов с коротким считыванием. PLoS One 7, e48314. doi:10.1371/journal.pone.0048314

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Миюшкович М., Chou, Y.-F., Gigi, V., Lindsay, C.R., Shestova, O., Lewis, S.M., et al. (2015). Нецелевая рекомбинация V(D)J запускает лимфомагенез и усиливается за счет потери C-конца Rag2. Cel Rep. 12, 1842–1852 гг. doi:10.1016/j.celrep.2015.08.034

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Мирман З., Лоттерсбергер Ф., Такай Х., Кибе Т., Гонг Ю., Такай К. и др. (2018). 53BP1-RIF1-Shieldin противодействует резекции DSB посредством CST- и Polα-зависимого заполнения. Природа 560, 112–116.doi:10.1038/s41586-018-0324-7

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Митренци И., Йылмаз Д. и Сутоглу Э. (2020). Как сохранить геном в ядерном пространстве. Курс. мнение Цель биол. 64, 58–66. doi:10.1016/j.ceb.2020.02.014

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Ник МакЭлхинни, С.А., Сноуден, К.М., Маккарвилл, Дж., и Рамсден, Д.А. (2000). Ку рекрутирует комплекс XRCC4-лигаза IV на концы ДНК. Мол. Цел. биол. 20, 2996–3003. doi:10.1128/MCB.20.9.2996-3003.2000

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Ноордермеер С. М., Адам С., Сетиапутра Д., Баразас М., Петтит С. Дж., Линг А. К. и др. (2018). Комплекс Shieldin опосредует 53BP1-зависимую репарацию ДНК. Природа 560, 117–121. doi:10.1038/s41586-018-0340-7

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Очи Т., Блэкфорд А. Н., Коутс Дж., Джхудж С., Мехмуд С., Тамура Н., и другие. (2015). PAXX, аналог XRCC4 и XLF, взаимодействует с Ku, чтобы способствовать восстановлению двухцепочечных разрывов ДНК. Наука 347, 185–188. doi:10.1126/science.1261971

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Оксеныч В., Альт Ф. В., Кумар В., Швер Б., Веземанн Д. Р., Хансен Э. и др. (2012). Функциональная избыточность между фактором восстановления XLF и медиатором ответа на повреждение 53BP1 в рекомбинации V (D) J и репарации ДНК. Проц. Натл. акад. науч. 109, 2455–2460.doi:10.1073/pnas.1121458109

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Оксеныч В., Кумар В., Лю X., Го К., Швер Б., Жа С. и др. (2013). Функциональная избыточность между факторами репарации ДНК XLF и DNA-PKcs при V(D)J-рекомбинации и негомологичном соединении концов ДНК. Проц. Натл. акад. науч. 110, 2234–2239. doi:10.1073/pnas.1222573110

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Полсон, Т. Г., Алмасан, А., Brody, L.L., and Wahl, G.M. (1998). Амплификация гена в P53-дефицитной клеточной линии требует прогрессирования клеточного цикла в условиях, вызывающих разрыв ДНК. Мол. Цел. биол. 18, 3089–3100. doi:10.1128/MCB.18.5.3089

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Фам Н., Ян З., Ю Ю., Фариа Африн М., Малкова А., Хабер Дж. Э. и др. (2021). Механизмы, ограничивающие репликацию, индуцированную разрывом, при двухконцевых двухцепочечных разрывах ДНК. ЭМБО Дж. 40, е104847. doi:10.15252/embj.2020104847

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Piazza, A., Bordelet, H., Dumont, A., Thierry, A., Savocco, J., Girard, F., et al. (2021). Когезин регулирует поиск гомологии во время рекомбинационной репарации ДНК. Нац. Цель биол. 23, 1176–1186. doi:10.1038/s41556-021-00783-x

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Пуругганан М.М., Шах С., Кирни Дж. Ф. и Рот Д. Б. (2001). Ku80 необходим для добавления N нуклеотидов к соединениям рекомбинации V(D)J терминальной дезоксинуклеотидилтрансферазой. Рез. нуклеиновых кислот. 29, 1638–1646. doi:10.1093/nar/29.7.1638

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Рамсден, Д. А., Карвахаль-Гарсия, Дж., и Гупта, Г. П. (2021). Механизм, клеточные функции и раковые роли соединения концов ДНК, опосредованного полимеразой-тета. Нац. Преподобный Мол. Цел Биол . Онлайн перед печатью. doi:10.1038/s41580-021-00405-2

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    Рейд Д. А., Киган С., Лео-Масиас А., Watanabe, G., Strande, N.T., Chang, H.H., et al. (2015). Организация и динамика негомологичного механизма соединения концов во время репарации двухцепочечных разрывов ДНК. Проц. Натл. акад. науч. США 112, E2575–E2584. doi:10.1073/pnas.1420115112

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Riballo, E., Woodbine, L., Stiff, T., Walker, S.A., Goodarzi, A.A., and Jeggo, P.A. (2009). XLF-Cernunnos способствует повторному аденилированию ДНК-лигазы IV-XRCC4 после лигирования. Рез. нуклеиновых кислот. 37, 482–492. doi:10.1093/nar/gkn957

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Роджерс С. Х., Мельчарек О. и Коркоран А. Э. (2021). Динамическая трехмерная организация локуса и ее драйверы лежат в основе рекомбинации иммуноглобулинов. Перед. Иммунол. 11, 1–9. doi:10.3389/fimmu.2020.633705

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Ропарс В., Древе П., Легран П., Баконне С., Амрам Дж., Форе Г. и др.(2011). Структурная характеристика филаментов, образованных комплексом Xrcc4-Cernunnos/XLF человека, вовлеченным в негомологичное соединение концов ДНК. Проц. Натл. акад. науч. 108, 12663–12668. doi:10.1073/pnas.1100758108

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Секигути Дж., Уитлоу С. и Альт Ф.В. (2001). Повышенное накопление гибридных соединений V(D)J в клетках, экспрессирующих укороченные, по сравнению с полноразмерными RAG. Мол. Чел 8, 1383–1390. doi:10.1016/s1097-2765(01)00423-3

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Сулас-Спрауэль, П., Le Guyader, G., Rivera-Munoz, P., Abramowski, V., Olivier-Martin, C., Goujet-Zalc, C., et al. (2007). Роль фактора репарации ДНК XRCC4 в рекомбинации переключателя класса иммуноглобулина. Дж. Экспл. Мед. 204, 1717–1727 гг. doi:10.1084/jem.20070255

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Стинсон Б.М., Морено А.Т., Уолтер Дж.К. и Лопаро Дж.Дж. (2020). Механизм минимизации ошибок при негомологичном соединении концов. Мол. Чел . 77, 1080–1091.e8. дои: 10. 1016 / j.molcel.2019.11.018

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Талукдер С.Р., Дадли Д.Д., Альт Ф.В., Такахама Ю. и Акамацу Ю. (2004). Повышенная частота аберрантных продуктов рекомбинации V(D)J у мышей, экспрессирующих ядро ​​RAG. Рез. нуклеиновых кислот. 32, 4539–4549. doi:10.1093/nar/gkh778

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Цай, С.Дж., Ким, С.А., и Чу, Г. (2007). Cernunnos/XLF способствует лигированию несовпадающих и несвязных концов ДНК. Проц. Натл. акад. науч. 104, 7851–7856. doi:10.1073/pnas.0702620104

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Таббс А. Т., Дорсет Ю., Чан Э., Хельминк Б., Ли Б.-С., Хунг П. и др. (2014). KAP-1 способствует резекции разорванных концов ДНК, не защищенных γ-h3AX и 53BP1, в лимфоцитах G1-фазы. Мол. Цел. биол. 34, 2811–2821. doi:10.1128/mcb.00441-14

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Вера Г. , Ривера-Муноз, П., Абрамовски, В., Маливерт, Л., Лим, А., Боле-Фейсот, К., и соавт. (2013). Дефицит Cernunnos снижает продолжительность жизни тимоцитов и изменяет репертуар Т-клеток у мышей и людей. Мол. Цел. биол. 33, 701–711. doi:10.1128/mcb.01057-12

    Полный текст CrossRef | Google Scholar

    Уокер Дж. Р., Корпина Р. А. и Голдберг Дж. (2001). Структура Ku-гетеродимера, связанного с ДНК, и ее значение для репарации двухцепочечных разрывов. Природа 412, 607–614.doi:10.1038/35088000

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Wyatt, D. W., Feng, W., Conlin, M. P., Yousefzadeh, M. J., Roberts, S. A., Mieczkowski, P., et al. (2016). Основные роли полимеразного θ-опосредованного соединения концов в восстановлении хромосомных разрывов. Мол. Чел . 63, 662–673. doi:10.1016/j.molcel.2016.06.020

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Yan, C. T., Boboila, C., Souza, E. K., Franco, S., Hickernell, T.Р., Мерфи М. и др. (2007). Переключение класса IgH и транслокации используют надежный неклассический путь соединения концов. Природа 449, 478–482. doi:10.1038/nature06020

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Ю. В., Лескаль К., Бабин Л., Бедора-Фор М., Ленден-Хассе Х., Барон Л. и др. (2020). Восстановление двухцепочечных разрывов ДНК, индуцированных G1, в S-G2 / M с помощью альтернативного NHEJ. Нац. коммун. 11, 5239. doi:10.1038/s41467-020-19060-w

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Захид, С., Seif El Dahan, M., Iehl, F., Fernandez-Varela, P., Le Du, M.-H., Ropars, V., et al. (2021). Многогранные роли Ku70/80. Междунар. Дж. Мол. Наука . 22, 4134. doi:10.3390/ijms22084134

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    Чжа С., Го С., Бобойла С., Оксеныч В., Ченг Х.-Л., Чжан Ю. и др. (2011). Реакция на повреждение ATM и фактор репарации XLF функционально избыточны при соединении разрывов ДНК. Природа 469, 250–254. doi:10.1038/nature09604

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Жа, С., Шао З. и Чжу Ю. (2021). Плие от DNA-PK: Танцы на ДНК. Мол. Сел 81, 644–646. doi:10.1016/j.molcel.2021.01.025

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    Zhang, Y., Zhang, X., Ba, Z., Liang, Z., Dring, E.W., Hu, H., et al. (2019). Фундаментальная роль экструзии петли хроматина в физиологической рекомбинации V(D)J. Природа 573, 600–604. doi:10.1038/s41586-019-1547-y

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Чжао, Ф., Kim, W., Gao, H., Liu, C., Zhang, Y., Chen, Y., et al. (2021). ASTE1 способствует репарации ДНК, опосредованной комплексом щитина, путем ослабления резекции концов. Нац. Цель биол. 23, 894–904. doi:10.1038/s41556-021-00723-9

    CrossRef Full Text | Google Scholar

    Zhu, C., Mills, K.D., Ferguson, D.O., Lee, C., Manis, J., Fleming, J., et al. (2002). Невосстановленные разрывы ДНК в клетках с дефицитом P53 приводят к амплификации онкогенных генов после транслокаций. сотовый 109, 811–821.doi:10.1016/s0092-8674(02)00770-5

    PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

    Нужно ли мне выезжать во время ремонта фундамента?

    Короткий ответ: нет .

    Нет, вам абсолютно не нужно выезжать в любое время на этапе осмотра, установки или подъема фундамента вашего дома.

    Правда в том, что вам не нужно выдвигаться для толкающего пирса или спиральной стабилизации/подъема.

    Вам не нужно выезжать из-за Concrete R&R.

    И вам не нужно выезжать для установки спиральных затяжек.

    Кроме того, если подрядчик говорит вам, что вы должны съехать на какой-либо из этих объектов, поскольку они начинают отступать в U-Haul, вы должны быть обеспокоены.

    Мы могли бы закончить сообщение в блоге прямо здесь, но здесь, в Dalinghaus Construction, , мы не верим в то, что просто отвечаем на вопросы… мы делаем все возможное, чтобы высказать опасения и/или опасения, стоящие за вопросом.

    Итак, вот наша короткая и милая статья о распространенных страхах.

    Обычно люди хотят знать, нужно ли им переезжать, исходя из трех основных соображений:

    1. Безопасен ли процесс установки?
    2. Я буду мешать?
    3. Вы (с вашими отбойными молотками, гидравлическими головками и громкими звуками) будете меня раздражать?

    Ответы: да, только если постараться, а разве большинству людей не нравятся громкие звуки? Конечно, давайте углубимся в некоторые детали.

    Безопасен ли процесс установки?

    Этот первоначальный вопрос вписан непосредственно в нашу ДНК за годы эволюционного выживания и зависимости от когнитивного механизма.

    Например, когда наши предки ковыляли по пыльной саванне и их преследовали саблезубые тигры (вероятно, самое тупое животное из всех), им приходилось либо карабкаться на дерево, либо сражаться камнем, палкой или столь же тупоголовым оружием.

    Идея заключалась в том, чтобы выжить, размножаться и производить потомство, чтобы ваши дети могли выживать, размножаться и производить.

    Теперь перенесемся в 2021 год с Tik Tok, двойными масками и миром, в котором заканчивается туалетная бумага.

    Суть человеческого состояния осталась прежней – выжить .

    Итак, после осмотра вы подписываете наше предложение и подсознательная, первобытная часть вашего мозга начинает думать —

      Эй, эти ребята собираются копать под основание моего фундамента, забивать трубу (проталкивающую или спиральную) черт знает как глубоко в землю, прикреплять ремонтные скобы к фундаменту с помощью мощных сверл , таких как Декстер, и затем закопайте весь этот металл под моим домом.

    Что, если они ударят по газопроводу, и мой дом БУХнет? – Не произойдет. Мы используем DigAlert .

    Что, если мой дом упадет с фундамента или обвалится на меня посреди ночи? – Ваш дом буквально должен нарушить столько законов физики…

    Что если , что если , что если – m Большинство из того, о чем мы беспокоимся в жизни, никогда не случится.  

    Здесь, в Dalinghaus Construction, мы стремимся к вашему выживанию и процветанию.Ладно, не то слово, но мысль вы поняли.

    Это всего лишь долгий путь, чтобы убедить вас в том, что ремонт фундамента безопасен.

    Две главные причины нашей безопасности:  

    1. Мы соблюдаем все рекомендации OSHA
    2. Все члены нашего экипажа проходят обширный инструктаж по технике безопасности

    Короче говоря, мы не играем с опасными пестицидами или химикатами. Мы никогда не нарушаем структурную целостность вашего дома.

    И нет, ваш дом не упадет на и не рухнет на вас посреди ночи.Мы часто получаем это…

    Буду ли я мешать?

    Если вы не прыгаете в наших раскопках, не играете в скакалку с нашими электрическими шнурами или не пытаетесь жонглировать отбойными молотками — вы не будете мешать.

    Как правило, единственный раз, когда нам приходится заходить внутрь, это первоначальный осмотр и последующий осмотр.

    Все остальное время мы проводим на свежем воздухе.

    Примечание. Время от времени нам нужно приходить к вам домой, если к несущей стене прикреплен фундамент, к которому нам нужно добраться.

    Более подробно об этой проблеме можно прочитать в разделе 2 «3 Распространенные проблемы при ремонте фундамента». Это редкое явление и минимальная инвазия.

    Так, нет, скорее всего, ты не мешаешь. И, если да, мы позаботимся о вашей безопасности.

    Будете ли вы (с вашими отбойными молотками, гидравлическими головками и громкими звуками) раздражать меня?  

    Большинство наших клиентов работают во время шумной части процесса установки.

    Для ремонта фундамента необходимо тяжелое оборудование.

    Типичный проект ремонта фундамента включает в себя отбойные молотки, генераторы и гидравлические двигатели (не более 100 децибел), как указано в наших 25 вопросах, которые следует задать при найме подрядчика по ремонту фундамента.

    Нет ничего, что пара наушников или берушей не помогла бы облегчить.

    Давайте поднимем эту штуку

    Вот и все – процесс ремонта фундамента безопасен, локализован и доставляет лишь временное неудобство.

    Процесс подъема волшебный и уникальный, особенно если у вас есть дети.

    Если вы находитесь в солнечной Южной Калифорнии или в окрестностях округа Марикопа в Аризоне, нажмите на ссылку ниже, чтобы заказать БЕСПЛАТНУЮ инспекцию фундамента —   

    Пластика паховой грыжи — NHS

    Пластика паховой грыжи может быть выполнена либо как открытая операция, либо как лапароскопическая операция (замочная скважина) .

    Больница вышлет вам инструкции о том, когда вам нужно прекратить есть и пить перед операцией.

    Операция обычно занимает от 30 до 45 минут, и обычно вы можете вернуться домой в тот же день.

    Некоторые люди остаются в больнице на ночь, если у них есть другие проблемы со здоровьем или они живут одни.

    Подробнее о восстановлении после пластики паховой грыжи

    Открытая хирургия

    Открытая пластика паховой грыжи часто выполняется под местной анестезией или регионарным анестетиком, вводимым в позвоночник.

    Это означает, что вы будете в сознании во время процедуры, но оперируемая область будет обезболена, поэтому вы не почувствуете боли.

    Иногда используется общий наркоз. Это означает, что вы будете спать во время процедуры и не почувствуете боли.

    После того, как анестезия подействовала, хирург делает надрез над грыжей. Длина этого разреза обычно составляет от 6 до 8 см.

    Затем хирург помещает комок жировой ткани или петлю кишечника обратно в брюшную полость (животик).

    Сетка помещается в брюшную стенку, в слабое место выхода грыжи, для ее укрепления.

    Когда ремонт будет завершен, ваша кожа будет зашита швами. Обычно они рассасываются сами по себе в течение нескольких дней после операции.

    Если грыжа стала ущемленной и часть кишки повреждена, может потребоваться удаление пораженного сегмента и воссоединение 2 концов здоровой кишки.

    Это более масштабная операция, и вам может потребоваться дольше оставаться в больнице.

    Лапароскопическая хирургия (замочная скважина)

    Общая анестезия используется для пластики паховой грыжи с замочной скважиной, поэтому во время операции вы будете спать.

    Во время операции с замочной скважиной хирург обычно делает 3 небольших разреза на животе вместо одного большого разреза.

    Тонкая трубка, содержащая источник света и камеру (лапароскоп), вводится через один из этих разрезов, чтобы хирург мог заглянуть внутрь брюшной полости.

    Хирургические инструменты вводятся через другие разрезы, чтобы хирург мог вправить грыжу на место.

    Существует 2 типа хирургии замочной скважины.

    Трансабдоминальная предбрюшинная хирургия (TAPP)

    Во время трансабдоминальной предбрюшинной хирургии инструменты вводятся через мышечную стенку живота и оболочку, покрывающую органы (брюшину).

    Лоскут брюшины отслаивается поверх грыжи, а кусок сетки прикрепляется степлером или приклеивается к ослабленному участку брюшной стенки для его укрепления.

    Тотально экстраперитонеальная хирургия (ТЭП)

    Тотально экстраперитонеальная хирургия является новейшей техникой «замочной скважины» и включает в себя пластику грыжи без доступа в брюшную полость.

    После завершения ремонта разрезы на коже зашиваются швами или хирургическим клеем.

    Какая техника лучше?

    Национальный институт здравоохранения и передового опыта (NICE), который оценивает медицинские методы лечения для NHS, говорит, что как замочная скважина, так и открытая хирургия грыжи безопасны и работают хорошо.

    При хирургии замочной скважины боль после операции обычно меньше, поскольку разрезы меньше. Также меньше повреждаются мышцы, а небольшие порезы можно закрыть клеем.

    Хирургия замочной скважины, как правило, имеет более быстрое время восстановления у людей, которые:

    • лечились ранее, и грыжа вернулась (рецидив грыжи)
    • имеют грыжи с обеих сторон одновременно (двусторонние грыжи)

    Но риск серьезных осложнений, таких как случайное повреждение кишечника хирургом, выше при хирургии через замочную скважину, чем при открытой операции.

    Риск возвращения грыжи одинаков после обеих операций.

    Обсудите преимущества и недостатки хирургии через замочную скважину и открытой хирургии со своим хирургом, прежде чем выбрать наиболее подходящее лечение.

    Принятие решения о том, какую технику использовать

    Выбор метода пластики паховой грыжи во многом зависит от:

    • вашего общего состояния здоровья  – пожилые люди или люди с плохим здоровьем могут быть слишком слабыми или немощными, чтобы безопасно проводить общую анестезию, поэтому открытая операция с использованием местной анестезии может быть сообщил
    • об опыте вашего хирурга – открытая хирургия более распространена, чем хирургия замочной скважины, и не все хирурги имеют достаточный опыт в методиках замочной скважины

    Британское общество грыж рекомендует использовать открытую технику для устранения большинства первичных односторонних грыж (появляющиеся впервые только с одной стороны).

    Техника замочной скважины обычно рекомендуется при рецидивирующих или двусторонних грыжах.

    Узнайте больше о методах хирургии на веб-сайте Британского общества грыж

    Время ожидания NHS

    Если врач общей практики направляет вас к консультанту для специализированного лечения, например хирургического, вы имеете право начать лечение в течение 18 недель.

    Возможно, вы сможете записаться на прием в больницу через Электронную справочную службу NHS, пока вы все еще находитесь в хирургии общей практики.

    Узнайте больше о времени ожидания NHS для лечения

    Последняя проверка страницы: 15 октября 2021 г.
    Следующая проверка должна быть завершена: 15 октября 2024 г.

    Ремонт и обслуживание: что делать во время пандемии

    Заботясь об оборудовании и тесно сотрудничая с сервисными службами, операторы могут снизить затраты на ремонт и обеспечить безопасность персонала.

    Помимо здравоохранения, трудно представить себе сектор, который ощутил влияние пандемии COVID-19 больше, чем общественное питание.Рестораны были закрыты, резко переведены на все формы обслуживания за пределами помещений, а оставшиеся помещения максимально вынесены за пределы помещений. Многие школьные предприятия общественного питания, от детских садов до колледжей, не открывались с марта, в то время как общеобразовательные кухни, особенно в больницах и домах престарелых, должны были радикально изменить свою работу.

    Эти изменения меняют не только то, что и когда готовят. Они влияют на заказ еды, потребности в персонале и, конечно же, на техническое обслуживание и ремонт оборудования.Со всеми изменениями в работе сейчас самое время подумать о том, когда и как операторы общественного питания из всех сегментов обращаются к сервисному агентству.

    Расходы можно сократить

    В связи с дефицитом бюджета операторы могут искать способы сократить свои расходы. Естественно взглянуть на сервис и посмотреть, есть ли жир, который нужно срезать. На самом деле, есть способы ограничить расходы на ремонт и техническое обслуживание, а также бывают случаи, когда обязательно нужно вызвать сервисного агента.

    По словам Скотта Хестера, президента компании Refrigerated Specialists Inc., расположенной в Меските, штат Техас., и специалистов по кухонному оборудованию, простая проверка того, что персонал использует оборудование должным образом, может помочь сократить число обращений в службу поддержки. Например, RSI нередко приходит на кухню, чтобы отремонтировать стол для пиццы, но обнаруживает, что проблема заключается в том, что персонал переполняет холодные кастрюли, что может вызвать тревогу, если температура попадет в опасную зону, в данном случае 41 градусов по Фаренгейту или выше.

    Другие основные проблемы использования сводятся к нагрузкам современной коммерческой кухни, говорит Кэролайн Киршник, президент базирующегося в Балтиморе сервисного агентства EMR.Проще говоря, кухонным работникам часто приходится спешить, чтобы уложиться в сроки. Это приводит к тому, что корзины фритюрницы ударяются о чан вместо того, чтобы дать капать жиру, двери захлопываются или закрываются ногой и т. д. Эти действия могут привести к вмятинам оборудования, сломанным корзинам и неисправным дверям, которые нуждаются в ремонте.

    Поскольку многие операторы сталкиваются с меньшим трафиком из-за обстоятельств, связанных с COVID-19, сейчас самое время напомнить работникам кухни о том, как обращаться с оборудованием в течение дня, говорит Киршник.

    Простое следование инструкциям производителя — еще один простой подход к снижению количества обращений в службу поддержки, которые могут потребоваться для оборудования. Соблюдение рекомендаций по очистке и техническому обслуживанию может помочь снизить количество отказов оборудования. «Прочитайте свое руководство», — говорит Пол Пумпутис, менеджер по выездному обслуживанию нью-йоркской компании Duffy’s AIS. «Прочитайте свое руководство и делайте то, что оно говорит вам для периодического обслуживания, и вы не пустите таких парней, как я, на свою кухню. Это самое главное».

    Действительно, типичное руководство пользователя содержит ряд шагов, которые операторы должны предпринять, чтобы их оборудование работало исправно.Эти обязанности могут включать в себя что угодно, от повседневных дел до ежеквартальных задач; их выполнение может предотвратить поломку.

    Многие из этих работ просты и включают очистку оборудования. Губка и немного чистящего средства не только сохранят внешний вид кухни, но и помогут предотвратить такие проблемы, как засорение горелок и засорение вентиляционных отверстий, которые могут привести к снижению производительности и отказу оборудования.

    Однако

    очистка оборудования не должна производиться бессистемно. Опять же, операторы должны обратиться к руководству пользователя, чтобы точно узнать, как выполнять протоколы очистки и с какими расходными материалами.«Каждый производитель любит разные химикаты для очистки, поэтому вы должны убедиться, что у вас есть нужные химикаты для правильного производителя, чтобы вы не причиняли больше вреда, чем пользы», — говорит Пумпутис.

    Другие задачи, описанные в руководстве пользователя, могут показаться более сложными, чем базовая очистка, но они все же выполнимы. Внимательно прочитав инструкции, операторы могут самостоятельно менять фильтры для воды и даже удалять накипь с некоторого оборудования, использующего воду. Такого рода рабочие места могут быть хорошим использованием времени, когда бизнес в противном случае идет медленно.

    Конечно, есть определенная черта, что операторы должны решать самостоятельно, а когда они должны вызывать специалистов. По словам Пумпутиса, операторы должны дважды подумать, прежде чем делать что-либо, требующее снятия панели и проникновения внутрь машины. И если работа требует работы с инженерными сетями, они должны обязательно обратиться в сервисное агентство. По его словам, такая работа не только сложна, но и может быть опасной, если ее выполняет кто-то, кто не обучен должным образом.

    Для Kirschnick линия еще более ясна: если холодильное устройство не обеспечивает стабильного хранения продуктов при безопасной температуре или если какое-либо горячее оборудование не всегда готовит пищу в отведенное время, позвоните в сервисный центр.

    Однако прежде чем звонить, операторы должны убедиться, что их проблема реальна. Раздражающие вопросы, которые часто задают компьютерные службы поддержки, возникают не просто так, и они относятся к кухонному оборудованию.

    Когда клиенты звонят в EMR, по словам Киршника, компания сначала спрашивает: «Он подключен к сети и есть ли питание?» Она объясняет: «Мы стараемся задавать все вопросы, чтобы операторы могли понять, могут ли они что-то сделать самостоятельно».

    Ключевые коммуникации

    Если проблему нельзя решить по телефону, операторы должны быть готовы предоставить как можно больше информации о проблеме.Это может увеличить вероятность быстрого ремонта. Это не только снижает затраты на ремонт, но и ограничивает контакт между выездным техником и персоналом кухни.

    По словам Киршника, такая информация, как марка, модель, серийный номер и точное поведение оборудования, всегда полезна для сервисного агентства. Это позволяет фирме предсказать основную причину проблемы, упаковать грузовик с соответствующими деталями и инструментами и отправить техника, который, как они знают, может справиться с работой.

    Однако получение четкой и конкретной информации может быть проблемой.В некоторых случаях удаленный менеджер информируется о проблеме и связывается с сервисным агентством. Для других операций, таких как крупная сеть, вызов осуществляет сторонний подрядчик.

    Операторы, считает Киршник, могли бы быть более гибкими в своих рабочих процессах, чтобы стимулировать более быстрые (и, следовательно, более дешевые и безопасные) вызовы службы поддержки. Короче говоря, назначьте человека на кухне для работы с сервисным агентством.

    «Было бы замечательно, если бы у нас были фотографии или короткие видеоролики о том, что делает оборудование, чтобы мы могли увидеть его еще до того, как доберемся туда.Тогда мы могли бы приехать подготовленными с запчастями и отправить действительно нужного техника», — говорит Киршник. «Чем больше информации, тем лучше. Это одна из самых важных вещей, которые клиенты могут сделать, чтобы ускорить обслуживание и ограничить контакт».

    Однако для бесперебойного обслуживания общение должно выходить за рамки описания проблем с оборудованием.

    Во многих учреждениях, многие из которых относятся к сфере здравоохранения, действуют особые правила относительно того, как люди могут входить в свои учреждения и какой вид проверки они должны пройти, чтобы пройти через дверь.Операторы должны сообщать эту информацию во время планирования, говорит Пумпутис.

    «В нашем бизнесе мы часто не заходим в парадную дверь, — объясняет Пумпутис. «Мы идем сзади, рядом с мусорным контейнером. Из-за COVID эти дни в значительной степени прошли, потому что в каждом учреждении есть какой-то протокол, согласно которому вы входите в парадную дверь, отвечаете на ряд вопросов и измеряете температуру, и они следят за тем, чтобы у вас была маска. Мы как бы спрашиваем [о протоколах заранее], просто чтобы убедиться, что мы в курсе.Мы не хотим случайно обойти их требования по пути».

    Однако такого рода соображения должны работать в обе стороны. В то время как сервисные агентства должны подготовиться и следовать рекомендациям, изложенным их клиентами, операторы должны внимательно относиться к выездным специалистам, работающим с их оборудованием.

    По словам Хестер, гибкое планирование может позволить агентам по обслуживанию заниматься техническим обслуживанием и ремонтом, когда вокруг меньше людей. Приход утром всего на полчаса раньше, чтобы впустить ремонтника, может обеспечить тип социальной дистанции, рекомендованный во время пандемии.«Дистанция в шесть футов важна, и иногда это сложно, когда мы работаем на линии приготовления пищи, а они работают, пытаясь достать еду. Мы просто пытаемся попросить место», — говорит он.

    Такое соображение сейчас может быть в моде, говорит Киршник. По ее наблюдениям, одним из положительных последствий пандемии является большее терпение между людьми. Компании понимают боль и проблемы, с которыми сталкиваются другие, поэтому они с большей готовностью помогают друг другу пережить день.Такое терпение может иметь большое значение для партнерства, которое предлагает больше, чем конечная выгода.

    «Кажется, стало немного больше понимания, терпимости, гибкости и взаимной поддержки. Я думаю, что это тоже очень полезно», — говорит Киршник. «Вначале так не казалось, потому что все действовали из страха, но по мере того, как мы все прошли через год этого, кажется, что стало намного больше взаимного уважения и гибкости и взаимопонимание между людьми в целом.” 

    COVID-19 – Борьба и профилактика – Услуги по ремонту на дому

    Учитывая развивающийся характер пандемии, OSHA находится в процессе пересмотра и обновления этого документа. Эти материалы могут больше не отражать текущие рекомендации и руководства OSHA. Для получения самой последней информации обратитесь к Руководству по защите работников.

    Это руководство не является стандартом или регламентом и не создает новых юридических обязательств. Он содержит рекомендации, а также описание обязательных стандартов безопасности и гигиены труда.Рекомендации носят рекомендательный характер, информационный характер и призваны помочь работодателям в обеспечении безопасных и здоровых условий труда. Закон о безопасности и гигиене труда требует от работодателей соблюдения стандартов и правил безопасности и гигиены труда, обнародованных OSHA или штатом с одобренным OSHA планом штата. Кроме того, статья Закона об общих обязанностях, раздел 5(a)(1), требует от работодателей предоставлять своим работникам рабочее место, свободное от общепризнанных опасностей, которые могут привести к смерти или серьезному физическому ущербу.

    В этом разделе приведены рекомендации для работников ремонтных служб на дому, например, тех, кто занимается установкой и ремонтом сантехники, электрики или систем отопления/кондиционирования/вентиляции. Это руководство дополняет общее временное руководство для работников в США и работодателей работников, которые могут подвергаться профессиональному риску заражения SARS-CoV-2.

    Для получения самой последней информации о рекомендациях OSHA см. «Защита работников: руководство по смягчению последствий и предотвращению распространения COVID-19 на рабочем месте».

    Работодатели должны оценивать опасности, которым могут подвергаться их работники; оценить риск воздействия; а также выбирать, внедрять и обеспечивать использование работниками средств контроля для предотвращения заражения. В приведенной ниже таблице приведены примеры рабочих задач, связанных с услугами по ремонту на дому, связанными с уровнями риска воздействия в пирамиде рисков профессионального воздействия OSHA, которая может служить руководством для работодателей в этом секторе.

    Примеры работ по ремонту на дому, связанных с уровнями риска воздействия
    Нижний (осторожно)
    Средний
    Высокий
    Очень высокий
    • Большинство работ по ремонту на дому связаны как минимум со средним риском воздействия.

    Примечание. Для деятельности в категории низкого риска (осторожность) наиболее подходящим может быть Временное руководство OSHA для работников и работодателей с низким риском воздействия .

    • В районах с продолжающимся распространением COVID-19 среди населения вход в дом, в котором нет признаков или симптомов, характерных для COVID-19.
    • Вход в дом человека, у которого подозревается или о котором известно, что у него есть COVID-19, в том числе, когда житель дома сообщает о признаках и симптомах, соответствующих COVID-19.
    • Выполнение работ с предметами, загрязненными человеческой кровью, биологическими жидкостями (включая отделы дыхательных путей, слизь и т. д.) или другими потенциально инфицированными материалами от людей с признаками или симптомами COVID-19.
    • Категория неприменима для большинства предполагаемых рабочих задач.

    Примечание. Большинство работ по ремонту на дому связаны не более чем с высоким риском воздействия; см. другие столбцы этой диаграммы. Избегайте задач, которые относят работников к этой категории риска, в том числе тех, которые могут привести к реаэрализации потенциально инфекционного SARS-CoV-2 с поверхностей окружающей среды.

    Технические средства управления

    В домашних условиях используйте закрытые двери и стены в качестве физических барьеров для отделения работников от любых лиц, находящихся на добровольном или обязательном самоизоляции или самоизоляции или у которых наблюдаются признаки и/или симптомы, характерные для COVID-19.

    Работодатели и работники могут также иметь возможность использовать пластиковую пленку, когда работникам необходимо занимать определенные части дома в течение длительного периода времени, которые также заняты такими потенциально заразными людьми.

    Административный контроль

    Административный контроль должен обеспечивать и отражать следующее:

    • Работодатели осведомлены о местных, государственных и федеральных рекомендациях в отношении COVID-19, а также осведомлены о распространении заболевания в географических районах, которые они обслуживают.
    • Работодатели проверяют звонки в момент составления расписания, чтобы оценить потенциальное воздействие и обстоятельства в доме, насколько это возможно, до входа работника.

    Ниже приведены примеры вопросов для проверки рабочих заданий перед отправкой работника для вызова службы поддержки. Обратите внимание, что некоторые из этих вопросов являются деликатными и личными, и перед ними следует пояснить, что они задаются только для защиты работников и сведения к минимуму распространения COVID-19.

    Контрольные вопросы
    Рекомендуемое действие
    1.Работа срочная или экстренная? Если «да», продолжите оценку опасности, чтобы определить, как лучше действовать, сводя к минимуму воздействие на работника. Другие вопросы в этой таблице (например, вопрос 3 и далее) могут помочь в проведении оценки опасностей.
    2. Является ли работа плановой профилактической или другой работой, которую можно отложить на более позднее время? Если «да», то работа факультативная (т.е. не экстренная), рассмотреть возможность переноса работы и не заходить в жилище до окончания пандемии COVID-19.
    3. Если работа определена как срочная или неотложная, спросите, есть ли дома люди, находящиеся на добровольном или обязательном карантине или изоляции из-за COVID-19? Строго соблюдайте рекомендуемые меры по предотвращению заражения, указанные в разделах «Технический контроль», «Административный контроль», «Практика безопасной работы» и «СИЗ».
    4. Если работа определена как срочная или неотложная, спросите, есть ли в доме люди, страдающие гриппоподобными симптомами? Если да, то будут ли они напрямую взаимодействовать с представителем службы? Строго соблюдайте рекомендуемые меры по предотвращению заражения, указанные в разделах «Технический контроль», «Административный контроль», «Практика безопасной работы» и «СИЗ».
    5. Следуя обычной практике, спросите адрес для вызова службы поддержки. Подумайте, находится ли дом в районе, где продолжается передача COVID-19. Работодатели могут рассмотреть вопрос о том, чтобы посоветовать обслуживающему персоналу прекратить оказание услуг, если дом расположен в районе, где продолжается передача COVID-19, и если работник или работодатель обеспокоен здоровьем и безопасностью на работе.

    Работодатели должны обучать работников сферы обслуживания на дому:

    • Признаки и симптомы COVID-19 и объяснение путей распространения болезни.
    • Все политики и процедуры, применимые к обязанностям сотрудника. Полезно предоставить сотрудникам письменную копию этих стандартных операционных процедур (СОП).
    • Информация о надлежащих методах социального дистанцирования и личной гигиены, включая:
      • По возможности держитесь на расстоянии не менее 6 футов от клиентов и других лиц.
      • Надлежащие методы уборки (например, часто мыть руки с мылом и водой в течение не менее 20 секунд или, если это невозможно, использовать дезинфицирующее средство для рук на спиртовой основе, содержащее не менее 60% спирта; дезинфицировать все поверхности, к которым прикасаются работники).
      • Правильный способ прикрываться при кашле и чихании в соответствии с рекомендациями CDC (т. е. чихать или кашлять в одноразовую салфетку или тряпку или в локтевой сгиб).
      • Альтернативы рукопожатию при входе и важность того, чтобы работники не касались своего лица (рта, носа, глаз).
    • Типы, правильное использование, ограничения, расположение, обращение, обеззараживание, удаление и утилизация любых используемых СИЗ.

    Работодатели также должны внедрять СОП и проводить обучение сотрудников, чтобы гарантировать, что перед входом в дома работники:

    • Просьба о том, чтобы все лица, находящиеся на добровольном или обязательном карантине или изоляции, или у которых есть признаки и/или симптомы COVID-19, оставались физически отделенными от работника (например,g., попросить, чтобы больной человек вышел в другую комнату, на другой уровень дома или на улицу, если позволяют погода и применимые экстренные приказы), если это возможно, и связаться с работником удаленно (например, по мобильному телефону, через Интернет). платежи и электронная подпись или подтверждение того, что работа выполнена).
    • Попросите людей в доме прикрываться при кашле и чихании.
    • Работодатели могут рассмотреть вопрос о том, чтобы посоветовать работникам сферы услуг прекратить оказание услуг, если помещенное на карантин/изолированное лицо(а) не выполняет вышеуказанные требования (например,г., не отходить на расстояние менее 6 футов, не прикрываться при кашле и чихании).
    • Попросите обеспечить хороший приток воздуха в общие помещения в доме, например, включив кондиционер или открыв окна, если позволяет погода, в соответствии с мерами предосторожности, рекомендованными Центром по контролю и профилактике заболеваний (CDC) для проживающих в доме людей.
    Безопасные методы работы

    Во всех случаях рекомендуется, чтобы работодатели снабжали работников перчатками и предоставляли дезинфицирующие и дезинфицирующие средства, которые работники могут использовать для протирания поверхностей или оборудования, к которым они прикасаются, включая любые общие ручки или стилусы.

    Как упоминалось выше, работники должны избегать рукопожатий с жильцами дома по прибытии или входе.

    Рабочие должны избегать прикосновения к своему лицу, в том числе к глазам, носу и рту, особенно до тех пор, пока они не вымоют руки после завершения работы и/или снятия СИЗ.

    Если это разрешено политикой работодателя, остановите работу и покиньте небезопасную рабочую среду, особенно если вы не можете сохранять безопасную дистанцию ​​от людей в доме, которые находятся в добровольном или обязательном карантине или изоляции, или которые испытывают признаки и/или симптомы COVID-19.

    Поощряйте оплату с помощью электронных средств или по телефону, а не с кредитными картами, дебетовыми картами или наличными.

    Средства индивидуальной защиты

    Большинству работников сферы обслуживания на дому вряд ли потребуются средства индивидуальной защиты, помимо тех, которые они используют для защиты себя во время рутинных рабочих задач. Тем не менее, работодатели должны подумать, оправдывают ли их оценки опасности и риска использование более защитных комплектов СИЗ.

    Приложить все усилия для защиты работников с помощью средств, отличных от средств индивидуальной защиты.

    Если других мер контроля недостаточно для защиты работников, снабдите тех, кто должен входить в потенциально опасные дома, необходимыми запасами соответствующих СИЗ. Комплекты СИЗ могут включать комбинацию перчаток, средств защиты глаз и/или лицевых щитков.

    В ограниченных обстоятельствах, включая ситуации, связанные с тесным (например, в пределах 6 футов) контактом с пострадавшим, может потребоваться защита органов дыхания, которую работодатель должен обеспечить в соответствии с критериями, приведенными ниже.

    • При наличии опасностей для органов дыхания работодатели должны соблюдать стандарт OSHA по защите органов дыхания (29 CFR 1910.134). OSHA обеспечивает гибкость правоприменения в соответствии со стандартом, в том числе посредством меморандумов о правоприменении.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.